對蝦種苗企業的(de)生存主(zhu)要(yao)是依靠蝦苗養殖效(xiao)果(guo)(guo)來決(jue)定的(de)，蝦苗成(cheng)(cheng)活率的(de)高(gao)低直接(jie)影(ying)響著產業鏈的(de)上上下(xia)下(xia)。單(dan)(dan)胞藻(zao)(zao)對于(yu)蝦苗早期是最適合(he)的(de)餌料，如果(guo)(guo)培育(yu)(yu)得當(dang)，不(bu)僅(jin)可(ke)以(yi)節約成(cheng)(cheng)本，減少(shao)育(yu)(yu)苗水體環境(jing)負(fu)荷，尤其(qi)是對于(yu)蝦苗的(de)發育(yu)(yu)打(da)下(xia)堅實(shi)的(de)基礎，提高(gao)成(cheng)(cheng)活率。結合(he)個(ge)人(ren)的(de)育(yu)(yu)苗感(gan)受，投喂單(dan)(dan)胞藻(zao)(zao)與不(bu)投喂的(de)區別還是有的(de)，比如苗的(de)變態時間縮(suo)短，活力個(ge)頭大小，水質均優于(yu)未投喂單(dan)(dan)胞藻(zao)(zao)的(de)苗，當(dang)然如果(guo)(guo)培育(yu)(yu)不(bu)得當(dang)，反作(zuo)用也有，比如投喂有害(hai)菌超標的(de)藻(zao)(zao)液，藻(zao)(zao)類老化(hua)，投喂過(guo)量等。所以(yi)合(he)理運用，方(fang)可(ke)收到理想(xiang)效(xiao)果(guo)(guo)。限于(yu)個(ge)人(ren)水平，描(miao)述方(fang)法的(de)錯誤(wu)不(bu)足之處(chu)，懇請大家(jia)指(zhi)正。
一 、單胞藻純培養室操作描述
儀器使用
（1） 超(chao)凈工作臺
使用前提(ti)前開(kai)機，打開(kai)紫外線燈(deng)和風機開(kai)關20分鐘。超(chao)凈臺面(mian)上不存放(fang)不必(bi)要的物品(pin)，保(bao)持工(gong)作區內(nei)的凈化氣(qi)流不受干(gan)(gan)擾(rao)，工(gong)作時(shi)盡(jin)量(liang)避免作明顯干(gan)(gan)擾(rao)氣(qi)流的動(dong)作；超(chao)凈臺保(bao)持光(guang)滑水(shui)(shui)平(ping)，光(guang)滑便于用酒精消毒布擦，水(shui)(shui)平(ping)是倒培養(yang)基時(shi)使培養(yang)皿(min)內(nei)平(ping)板厚度一致。工(gong)作時(shi)超(chao)凈臺周(zhou)圍空氣(qi)流動(dong)要緩慢(man)，雜(za)菌盡(jin)量(liang)減(jian)少(shao)，所以要定(ding)期(qi)清潔消毒保(bao)種(zhong)室內(nei)，關閉門窗，盡(jin)可能減(jian)少(shao)雜(za)菌數量(liang)；空氣(qi)過濾網(wang)定(ding)期(qi)清潔。
（2）真空泵和溶劑(ji)過濾器及過濾膜
此環節過濾只是為單胞藻純培養室（保種(zhong)，提純，擴培試管級(ji)）準備清潔無菌海(hai)水。其他級(ji)別的培養無需此環節。
過(guo)濾膜使用0.2微米孔徑(jing)，不可用手(shou)拿，用鑷子選取。真(zhen)空泵(beng)與溶(rong)劑過(guo)濾器之間通過(guo)合(he)適口徑(jing)的橡膠管(guan)連接緊密(mi)，每次過(guo)濾要注意濾膜的過(guo)濾效(xiao)果(guo)，防止濾孔阻(zu)塞影響過(guo)濾效(xiao)果(guo)。濾瓶(ping)內(nei)的濾液不能沒過(guo)濾板出水口，否則濾液將被(bei)抽吸入真(zhen)空泵(beng)，導致(zhi)真(zhen)空泵(beng)損壞。
應該使濾(lv)板內的營養液過濾(lv)盡后（無水滴）才能停泵。要定期注意(yi)真空泵內油量，注意(yi)加(jia)油。
(3) 恒(heng)溫鼓(gu)風干燥箱(xiang)
設(she)定(ding)溫度(du)時(shi)。先(xian)按控(kong)溫儀功能鍵SET進(jin)入溫度(du)設(she)定(ding)狀(zhuang)態，此時(shi)SP設(she)定(ding)顯示(shi)(shi)(shi)一(yi)(yi)(yi)閃一(yi)(yi)(yi)閃，要按移動(dong)位鍵配合加鍵或減鍵，設(she)定(ding)時(shi)先(xian)從(cong)分位數字設(she)定(ding)，一(yi)(yi)(yi)直到百位數，設(she)定(ding)結束(shu)需按一(yi)(yi)(yi)下功能鍵SET,此時(shi)干(gan)燥箱進(jin)入升(sheng)溫狀(zhuang)態，加熱指(zhi)示(shi)(shi)(shi)燈(deng)亮，當箱內溫度(du)接(jie)近設(she)定(ding)溫度(du)時(shi)，加熱指(zhi)示(shi)(shi)(shi)燈(deng)閃動(dong)多(duo)次，控(kong)制進(jin)入恒溫狀(zhuang)態。
使用注意(yi)事項：物(wu)(wu)品不(bu)能(neng)堆得太滿，更不(bu)能(neng)堵住(zhu)出風口，以免影響溫(wen)(wen)度均勻(yun)上升。若是有(you)牛(niu)皮紙和(he)保鮮膜時，溫(wen)(wen)度不(bu)能(neng)超(chao)過180度。取出物(wu)(wu)品時，箱(xiang)內外(wai)溫(wen)(wen)差不(bu)宜過高(gao)，防止(zhi)玻(bo)璃(li)器皿炸裂。橡膠制品不(bu)能(neng)放(fang)入。
（4）加濕(shi)器
配合(he)生化(hua)培養箱使用。
水(shui)源是蒸餾水(shui)；不(bu)應(ying)容(rong)器(qi)(qi)內帶水(shui)移動(dong)加濕器(qi)(qi)；加水(shui)時應(ying)在容(rong)器(qi)(qi)上表(biao)示的滿水(shui)線為止。
應注意的(de)事(shi)項：平時留意觀察水箱的(de)存水量，及時予以補充，遠離熱源(yuan)，腐蝕(shi)物(wu)。
（5）蒸汽消毒器
容器加水時(shi)(shi)，水位(wei)一定(ding)要(yao)超過電熱管(guan)(guan)，最好是到(dao)3個支撐點的(de)下緣，如果連續使(shi)用，應(ying)在每(mei)次消毒(du)前補足(zu)蒸(zheng)發水量(liang)，不然少水會燒(shao)壞電熱管(guan)(guan)。蓋上的(de)放氣軟管(guan)(guan)插入消毒(du)桶圓槽內，對(dui)正(zheng)蓋和主體(ti)的(de)螺栓槽，依次將(jiang)相(xiang)對(dui)方的(de)翼(yi)型螺母予以旋緊，使(shi)蓋與主體(ti)密(mi)合，加熱開始時(shi)(shi)，應(ying)將(jiang)放氣閥(fa)與安全閥(fa)的(de)小手柄扳(ban)至(zhi)垂直放氣方位(wei)，必須待有較急蒸(zheng)汽噴出(chu)，即將(jiang)小手柄扳(ban)回水平(ping)“關閉”方位(wei)。
當到達所需(xu)壓(ya)力和溫度(du)，計算消毒時(shi)間，消毒畢(bi)后(hou)，關閉電源，待壓(ya)力指針指向(xiang)0時(shi)，將放氣(qi)閥的小手(shou)柄扳至垂直(zhi)放氣(qi)方(fang)位，氣(qi)放完后(hou)，打(da)開容器(qi)蓋。物品消毒后(hou)要迅速(su)干(gan)燥。
應注意滅菌液體(ti)時(shi)，不(bu)(bu)超(chao)過盛(sheng)液體(ti)容器體(ti)積(ji)的(de)(de)3/4，瓶塞(sai)不(bu)(bu)可用軟木塞(sai)或(huo)未打孔的(de)(de)橡膠(jiao)塞(sai)。滅菌器內冷空(kong)(kong)氣(qi)必(bi)須完(wan)全排除。因為(wei)空(kong)(kong)氣(qi)的(de)(de)膨脹(zhang)壓(ya)大于(yu)水(shui)(shui)蒸氣(qi)的(de)(de)膨脹(zhang)壓(ya)，當水(shui)(shui)蒸氣(qi)含冷空(kong)(kong)氣(qi)時(shi)，壓(ya)力表所(suo)表示的(de)(de)壓(ya)力是水(shui)(shui)蒸氣(qi)壓(ya)力和部分冷空(kong)(kong)氣(qi)壓(ya)力之(zhi)和，不(bu)(bu)是水(shui)(shui)蒸氣(qi)的(de)(de)實際壓(ya)力，而同(tong)一壓(ya)力下的(de)(de)實際溫(wen)度，含空(kong)(kong)氣(qi)的(de)(de)蒸汽低于(yu)飽(bao)和蒸汽，這樣導致(zhi)達不(bu)(bu)了消毒效(xiao)果。絕不(bu)(bu)可堵塞(sai)安(an)全閥出氣(qi)孔，必(bi)須留空(kong)(kong)位保證其暢通(tong)放氣(qi)，發現(xian)超(chao)溫(wen)超(chao)壓(ya)，立即斷電。
蒸餾器
先關(guan)閉(bi)放(fang)水(shui)(shui)(shui)閥，打開(kai)進(jin)水(shui)(shui)(shui)閥，待(dai)溢水(shui)(shui)(shui)皮管(guan)有水(shui)(shui)(shui)流(liu)(liu)出，方可(ke)接通電源(yuan)，此時可(ke)暫時關(guan)閉(bi)進(jin)水(shui)(shui)(shui)閥，待(dai)出水(shui)(shui)(shui)皮管(guan)有蒸餾水(shui)(shui)(shui)流(liu)(liu)出，打開(kai)進(jin)水(shui)(shui)(shui)閥，制備蒸餾水(shui)(shui)(shui)。定期清(qing)洗蒸餾器內壁(bi)，除去水(shui)(shui)(shui)垢，不然影響(xiang)蒸餾水(shui)(shui)(shui)質量和使用效果。切不可(ke)關(guan)閉(bi)水(shui)(shui)(shui)閥制備蒸餾水(shui)(shui)(shui)，否則(ze)燒壞電熱(re)管(guan)。
（6）鼓風機
定期更換吸氣口的(de)過濾棉，異常情況，請(qing)電(dian)工檢查。
（7）空調
保種(zhong)室若有(you)生長藻種(zhong)，需維持恒定溫度，反之關(guan)閉。一(yi)級(ji)，二級(ji)空調視外界(jie)氣(qi)溫調整開關(guan)。
二 、衛生消毒
工具衛生消毒
1、濾(lv)水筒式過濾(lv)器。筒式過濾(lv)器的濾(lv)芯應(ying)用(yong)(yong)一次更換一次，用(yong)(yong)過的濾(lv)芯浸(jin)泡(pao)在1%鹽酸(suan)溶(rong)液中消毒(du)12h以上。然后用(yong)(yong)洗潔精清洗，再用(yong)(yong)足量(liang)清水沖(chong)洗干(gan)凈，晾(liang)干(gan)備用(yong)(yong)。（濾(lv)芯規格應(ying)小于等于0.5微米(mi)）。
2、試管(guan)(guan)(guan)（規(gui)格(ge)10毫(hao)升(sheng)(sheng)到20毫(hao)升(sheng)(sheng)），錐形瓶（50毫(hao)升(sheng)(sheng)到200毫(hao)升(sheng)(sheng)），500ml錐形瓶，2.5L瓶廣(guang)口瓶，移液(ye)管(guan)(guan)(guan)，移液(ye)槍(qiang)管(guan)(guan)(guan)/盒(he)，玻璃(li)氣(qi)(qi)管(guan)(guan)(guan)，膠(jiao)(jiao)氣(qi)(qi)管(guan)(guan)(guan)，氣(qi)(qi)石，溶(rong)劑過(guo)濾器，培(pei)養皿。用過(guo)后應當用清(qing)水(shui)清(qing)洗(xi)(xi)后浸(jin)泡于1% 鹽酸(suan)12h以上（溶(rong)劑過(guo)濾器除外，浸(jin)泡時(shi)相近大小(xiao)器皿分(fen)類(lei)放(fang)不同的消毒桶，規(gui)格(ge)相差大，易導致(zhi)相互碰撞碎爛）然后用洗(xi)(xi)潔(jie)精清(qing)洗(xi)(xi)(用毛(mao)刷清(qing)洗(xi)(xi)試管(guan)(guan)(guan)底部時(shi)，不可太用力(li)，否則底部易破裂)，再用大量清(qing)水(shui)沖洗(xi)(xi)干凈，風干或曬干，高壓滅菌(jun)后，放(fang)入恒溫干燥(zao)箱(xiang)（膠(jiao)(jiao)氣(qi)(qi)管(guan)(guan)(guan)，氣(qi)(qi)石除外）干燥(zao)備用。
3、聚(ju)乙烯藻(zao)(zao)袋(dai)用(yong)(yong)于(yu)(yu)二(er)級藻(zao)(zao)類藻(zao)(zao)種(zhong)掛袋(dai)培養或3級擴培（一般使用(yong)(yong)盛裝(zhuang)藻(zao)(zao)液12升左右(you)）。先(xian)用(yong)(yong)清水沖洗干(gan)(gan)凈內外，浸泡于(yu)(yu)1% 鹽酸12h以上，再用(yong)(yong)大量清水沖洗干(gan)(gan)凈，風干(gan)(gan)或曬干(gan)(gan)，備(bei)用(yong)(yong)。由于(yu)(yu)藻(zao)(zao)袋(dai)近(jin)似密(mi)封(feng)性，對于(yu)(yu)防止微生(sheng)物污染(ran)有很好的效果(guo)。
4、毛(mao)巾(jin)、保種室，一級(ji)和二級(ji)毛(mao)巾(jin)不可混用，所用毛(mao)巾(jin)后都應消毒清洗(xi)晾干后備用。
5、錫箔(bo)紙：除非粘上油污(wu)或污(wu)物以及破損，都應重復使用。
6、牛皮紙：定期拿到烘(hong)箱烘(hong)干。
7、定期更換空氣過濾器（用于1，2級培養的進氣過濾）的濾芯，濾芯已油(you)化或(huo)沖散的棄去。
8、定期(qi)更(geng)換鼓風機進風口的過(guo)濾棉。
9、對新購入(ru)的器皿(min)應先除去包裝沾染的污垢后，用洗潔精刷洗，流水沖(chong)凈(jing)，再(zai)(zai)浸泡于1%的鹽(yan)酸12h，使游(you)離(li)的堿性(xing)物質除去，再(zai)(zai)用清水沖(chong)洗干凈(jing)，風(feng)干或曬干備用。
室內衛生消毒
1、保種室(shi)每天早(zao)上用清(qing)水擦洗實驗臺(tai)面，地板，墻壁，木架后，開(kai)紫外燈(deng)消毒20分鐘，此時(shi)關(guan)(guan)掉空調，關(guan)(guan)掉日光(guang)燈(deng)，由于(yu)紫外燈(deng)照射(she)會產生一(yi)(yi)定(ding)量的臭(chou)氧(yang)，對(dui)人體(ti)有害，所以消毒關(guan)(guan)閉紫外燈(deng)后人應隔一(yi)(yi)段(duan)時(shi)間再進去。進保種室(shi)換(huan)鞋(xie)。
2、一級和二(er)級室每天(tian)清潔，接種前接種后承載(zai)物框架(jia)都應(ying)用消毒(du)液消毒(du)。
3、門口消毒池定期更換消毒藥水（高錳酸(suan)鉀）。
4、常用消毒(du)劑濃度 1%鹽酸(suan)(suan)，次氯(lv)酸(suan)(suan)鈉20ppm（有效氯(lv)），碘液（1000ppm）,酒精70-75%,高錳酸(suan)(suan)鉀1mg/L。
三 、接種
藻種固體培養基制備
所需(xu)燒(shao)杯，玻棒須清(qing)洗干(gan)凈，錐形瓶(ping)和培養(yang)(yang)皿須消(xiao)毒清(qing)洗滅(mie)(mie)菌烘干(gan)。將稱好的(de)純(chun)化(hua)瓊脂粉加入燒(shao)杯再加入一定(ding)量的(de)海水，加熱（必須不停攪拌，以免(mian)瓊脂糊底燒(shao)焦(jiao)）至完全(quan)融(rong)化(hua)，加熱后(hou)的(de)瓊脂培養(yang)(yang)基(ji)應(ying)當透明(ming)無顯(xian)著沉淀，若明(ming)顯(xian)，可采用清(qing)潔的(de)白色薄絨布(bu)或中間夾有薄層吸水棉的(de)雙(shuang)層紗布(bu)鋪在漏斗上趁熱過濾，融(rong)化(hua)畢后(hou)精確加入營養(yang)(yang)鹽（維生素B溶液須等培養(yang)(yang)基(ji)高壓滅(mie)(mie)菌后(hou)冷卻至50攝氏度以下再加）。
培(pei)(pei)養基(ji)采用121攝(she)(she)氏度高壓(ya)蒸(zheng)汽滅菌(jun)20至(zhi)30分(fen)鐘即(ji)可，培(pei)(pei)養基(ji)滅菌(jun)后(hou)應立(li)即(ji)取(qu)出，冷卻(que)至(zhi)50攝(she)(she)氏度以下，即(ji)加維生素B溶液(ye)。將(jiang)(jiang)盛裝培(pei)(pei)養基(ji)的錐(zhui)形瓶(ping)和培(pei)(pei)養皿放(fang)(fang)在超(chao)凈工(gong)作臺(tai)上(shang)，點(dian)燃酒精燈(deng)，右手托(tuo)起錐(zhui)形瓶(ping)底，將(jiang)(jiang)瓶(ping)口在酒精燈(deng)稍加燒，然后(hou)迅速將(jiang)(jiang)培(pei)(pei)養基(ji)倒入(ru)培(pei)(pei)養皿中，以鋪滿皿底為止（厚薄適(shi)中）。鋪放(fang)(fang)好后(hou)，放(fang)(fang)置(zhi)20-30分(fen)鐘，待培(pei)(pei)養基(ji)凝固后(hou)，即(ji)開始操作。
若是做斜面(mian)培(pei)養(yang)基(ji)，則加入維生素B溶液后，將盛裝培(pei)養(yang)基(ji)的(de)錐形瓶和(he)試管(guan)以及一根厚約1厘米的(de)小(xiao)木板(ban)放在超(chao)凈工作臺上(shang)。分裝約為試管(guan)高(gao)度(du)的(de)1/3-2/3（視(shi)情況操作），分裝量(liang)應(ying)以能(neng)形成2/3底層和(he)1/3斜面(mian)量(liang)為好，擺置(zhi)成適(shi)當斜面(mian)，待其自然凝固。培(pei)養(yang)基(ji)制備好后，如發現(xian)破(po)裂，水分浸(jin)入，色澤異(yi)常等均應(ying)棄去.
待(dai)凝固后即(ji)進(jin)行操作，現一般采(cai)用平板劃線接種(zhong)和涂布接種(zhong)。
平板劃線接種
接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環在(zai)(zai)(zai)酒精燈火(huo)焰上充分燒紅后(hou)(hou)，接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)柄一(yi)邊(bian)轉動(dong)一(yi)邊(bian)慢慢來回(hui)通過火(huo)焰3次，待(dai)冷卻(que)至室溫方可(ke)挑取藻種(zhong)(zhong)(zhong)（為(wei)保證(zheng)藻種(zhong)(zhong)(zhong)不(bu)(bu)(bu)被(bei)燙死(si)，挑種(zhong)(zhong)(zhong)前(qian)可(ke)將(jiang)接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環接(jie)(jie)(jie)(jie)觸(chu)(chu)培養(yang)皿(min)內(nei)(nei)壁或(huo)培養(yang)基），迅速接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)至新培養(yang)基（劃(hua)線可(ke)采用(yong)(yong)斜線法(fa)(fa)，方格法(fa)(fa)，曲(qu)線法(fa)(fa)，放射法(fa)(fa)等）。左手(shou)握住平(ping)板，用(yong)(yong)大(da)(da)拇指(zhi)和食(shi)指(zhi)稍(shao)稍(shao)抬起皿(min)蓋(gai)，同時靠近火(huo)焰周圍，右手(shou)持接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環伸(shen)入皿(min)內(nei)(nei)，在(zai)(zai)(zai)平(ping)板上一(yi)個區域作劃(hua)線（依方法(fa)(fa)不(bu)(bu)(bu)同，動(dong)作不(bu)(bu)(bu)同）。劃(hua)線時使接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環與(yu)平(ping)板表(biao)面(mian)成30-40度角輕輕接(jie)(jie)(jie)(jie)觸(chu)(chu)，以腕力在(zai)(zai)(zai)表(biao)面(mian)作較快的(de)滑動(dong)（注(zhu)意不(bu)(bu)(bu)要劃(hua)破平(ping)板表(biao)面(mian)或(huo)伸(shen)進培養(yang)基內(nei)(nei)）。接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環挑種(zhong)(zhong)(zhong)后(hou)(hou)和劃(hua)線完(wan)抽(chou)出時均不(bu)(bu)(bu)可(ke)碰(peng)及皿(min)壁/口(kou)(kou)，更不(bu)(bu)(bu)能(neng)碰(peng)其(qi)它物體和臺面(mian)。接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)完(wan)后(hou)(hou)，將(jiang)接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環從柄部至環端(duan)(duan)逐漸(jian)通過酒精燈火(huo)焰滅菌(jun)，不(bu)(bu)(bu)能(neng)直接(jie)(jie)(jie)(jie)燒環，以免殘(can)留(liu)在(zai)(zai)(zai)接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環上的(de)藻體或(huo)菌(jun)體爆濺污染(ran)空(kong)間。上述操作完(wan)成后(hou)(hou)，即用(yong)(yong)無菌(jun)封口(kou)(kou)膜(mo)封培養(yang)皿(min)口(kou)(kou)（膜(mo)使用(yong)(yong)前(qian)須(xu)用(yong)(yong)酒精消毒，紫外燈消毒，風干），封口(kou)(kou)時，用(yong)(yong)左手(shou)大(da)(da)拇指(zhi)摁住膜(mo)一(yi)邊(bian)末端(duan)(duan)，右手(shou)大(da)(da)拇指(zhi)和食(shi)指(zhi)捏住另一(yi)邊(bian)末端(duan)(duan)，迅速繞培養(yang)皿(min)口(kou)(kou)繞一(yi)圈(quan)，封口(kou)(kou)。
涂布接(jie)種
所用種液(ye)(ye)必須經過弧菌檢(jian)測合格后方可使用。涂(tu)(tu)布(bu)棒(bang)在火焰(yan)(yan)上(shang)(shang)慢(man)(man)慢(man)(man)來(lai)回過火焰(yan)(yan)3次(ci)，冷(leng)卻（不(bu)可驟冷(leng)），將種液(ye)(ye)用移液(ye)(ye)槍從試(shi)管(guan)吸出注入平(ping)板(ban)上(shang)(shang)面(mian)（槍管(guan)不(bu)可碰(peng)及試(shi)管(guan)外壁(bi)，更不(bu)能(neng)碰(peng)及其它物品或臺面(mian)），迅速用涂(tu)(tu)布(bu)棒(bang)在表面(mian)作來(lai)回左右(you)的涂(tu)(tu)布(bu)，讓藻液(ye)(ye)分布(bu)均(jun)勻，畢(bi)后，封口同(tong)平(ping)板(ban)劃線。
試管液體培養基接種
所(suo)用種液必須經過(guo)弧菌檢測合格(ge)后方可使用。火(huo)焰(yan)滅(mie)(mie)菌前試(shi)(shi)管(guan)(guan)口(kou)(kou)(kou)外(wai)壁不(bu)(bu)(bu)能有水滴(di)（易導致受(shou)熱不(bu)(bu)(bu)均(jun)而破裂）,燒試(shi)(shi)管(guan)(guan)口(kou)(kou)(kou)時(shi)(shi)，試(shi)(shi)管(guan)(guan)傾(qing)斜45度角，不(bu)(bu)(bu)斷移動(dong)試(shi)(shi)管(guan)(guan)，使試(shi)(shi)管(guan)(guan)口(kou)(kou)(kou)受(shou)熱均(jun)勻，滅(mie)(mie)菌時(shi)(shi)間3秒(miao)左(zuo)右。滅(mie)(mie)菌后不(bu)(bu)(bu)能驟(zou)冷，防(fang)止試(shi)(shi)管(guan)(guan)破裂。畢后，用盛裝(zhuang)營養(yang)液150或200ml的錐(zhui)形瓶(ping)(ping)（也要滅(mie)(mie)菌瓶(ping)(ping)口(kou)(kou)(kou)）向試(shi)(shi)管(guan)(guan)中傾(qing)倒(dao)營養(yang)液，每次只能拿(na)一個試(shi)(shi)管(guan)(guan)（注：若幾個試(shi)(shi)管(guan)(guan)對比(bi)時(shi)(shi)，可以(yi)同時(shi)(shi)拿(na)在手里，用大拇指(zhi)和手掌），倒(dao)好后，同樣試(shi)(shi)管(guan)(guan)和錐(zhui)形瓶(ping)(ping)口(kou)(kou)(kou)滅(mie)(mie)菌，試(shi)(shi)管(guan)(guan)塞也要滅(mie)(mie)菌，塞試(shi)(shi)管(guan)(guan)塞時(shi)(shi)不(bu)(bu)(bu)要移動(dong)試(shi)(shi)管(guan)(guan)迎接塞，以(yi)免試(shi)(shi)管(guan)(guan)在移動(dong)中納入可能含(han)菌空氣，火(huo)焰(yan)旁為無(wu)菌。
所有試(shi)管分(fen)裝好后(hou)，即接種(zhong)。用移液(ye)(ye)(ye)槍(qiang)(qiang)(qiang)選(xuan)取移液(ye)(ye)(ye)量（試(shi)管口滅菌(jun)），注入新培(pei)(pei)養基，槍(qiang)(qiang)(qiang)管不可碰及(ji)管外壁，更不能(neng)碰及(ji)其它物(wu)品或臺(tai)面，一(yi)支槍(qiang)(qiang)(qiang)管只能(neng)和同一(yi)種(zhong)液(ye)(ye)(ye)使(shi)(shi)用，選(xuan)取另一(yi)試(shi)管種(zhong)液(ye)(ye)(ye)時(shi)必須更換槍(qiang)(qiang)(qiang)頭。接種(zhong)畢后(hou)，選(xuan)取合適光照溫度培(pei)(pei)養。由于試(shi)管培(pei)(pei)養是(shi)靜置(zhi)培(pei)(pei)養，而在(zai)靜置(zhi)條件下，藻(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)會聚(ju)集在(zai)試(shi)管底部(bu)，且藻(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)周圍會形(xing)成透過養分(fen)的屏障，營養鹽的攝入受(shou)阻，光照吸收(shou)不均，為(wei)使(shi)(shi)營養鹽攝入正常，藻(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)受(shou)光均勻，需要定時(shi)搖(yao)置(zhi)試(shi)管（手先噴消毒酒精(jing)，手腕使(shi)(shi)勁(jing)搖(yao)，不要擺臂(bei)，不能(neng)倒(dao)置(zhi)搖(yao)）
三角瓶，500ml瓶，2.5L瓶液體培養基接種
三角瓶(ping)(ping)接種(zhong)需(xu)無菌(jun)操作。500ml瓶(ping)(ping)，2.5L瓶(ping)(ping)液體培(pei)養(yang)基接種(zhong)均在室(shi)內衛生條件(jian)下操作。3種(zhong)瓶(ping)(ping)和(he)所需(xu)營(ying)養(yang)液及錫紙，移液管，洗耳球，氣管，氣石(shi)均需(xu)經消毒清洗，滅(mie)菌(jun)后使用。三角瓶(ping)(ping)需(xu)定時搖置，500ml，2.5L瓶(ping)(ping)培(pei)養(yang)在通氣條件(jian)下培(pei)養(yang)。
二級聚乙烯藻袋液體培養基接種
氣(qi)管，氣(qi)石均需經(jing)消(xiao)毒清洗，滅菌后(hou)使用(yong)，抽(chou)藻管前次(ci)(ci)用(yong)畢后(hou)應(ying)當用(yong)水(shui)泵(beng)將管內灌滿(man)消(xiao)毒鹽酸溶液，今次(ci)(ci)用(yong)前需用(yong)海水(shui)或淡水(shui)沖洗干(gan)凈后(hou)使用(yong)。選取的(de)種液應(ying)當是無明顯沉淀，泡沫，原(yuan)生(sheng)動物，附著物，色澤正常，藻細胞(bao)密度(du)大，形態(tai)正常，弧菌檢測(ce)合格后(hou)選用(yong)。所用(yong)海水(shui)漂(piao)白(bai)水(shui)消(xiao)毒有效氯(lv)應(ying)足10ppm，曝氣(qi)12小(xiao)時，檢測(ce)余(yu)氯(lv)，加(jia)硫(liu)代硫(liu)酸鈉(na)中和，方可使用(yong)。若使用(yong)稀(xi)釋的(de)漂(piao)白(bai)水(shui)，應(ying)當天配制當天使用(yong)，而未使用(yong)的(de)要(yao)在24小(xiao)時后(hou)棄去。且稀(xi)釋的(de)漂(piao)白(bai)水(shui)必須加(jia)蓋放在避光的(de)容器(qi)內保存。由(you)于漂(piao)白(bai)水(shui)會隨(sui)時間(jian)漸(jian)漸(jian)分解，一次(ci)(ci)性購入的(de)漂(piao)白(bai)水(shui)不應(ying)太(tai)多，不要(yao)過(guo)量(liang)儲存，以免影響(xiang)滅菌功效。
1,2，3級接藻示意
試管→三角瓶→500ml瓶子(zi)→2500ml瓶子(zi)→20升的藻(zao)種聚(ju)乙烯袋(dai) →18升的擴培藻(zao)聚(ju)乙烯袋(dai)或者培藻(zao)池
相關說明
1、母(mu)(mu)液的配置可以(yi)參考教科書上所寫(xie)，然后(hou)(hou)結合當(dang)地的水質(zhi)適當(dang)修改即(ji)可。氮，磷，鐵元素，維(wei)生素B1,B12是必須使(shi)用(yong),維(wei)生素母(mu)(mu)液保存于低溫弱光環(huan)境下(xia)，其中(zhong)維(wei)生素的添加需要先(xian)高(gao)壓滅菌后(hou)(hou)再(zai)加入母(mu)(mu)液中(zhong)。其余營養鹽先(xian)配置好后(hou)(hou)，再(zai)滅菌。如果是硅藻類，還應加上硅酸鈉。
2、保(bao)種室所需營養液（母液千分(fen)之0.8的比例(li)添加）除需高壓滅菌外還必須經過真(zhen)空(kong)泵抽濾(lv)后才能用，微孔濾(lv)膜直徑為50毫米(mi)，孔徑為0.2微米(mi)。
3、接種(zhong)(zhong)比例A:試(shi)(shi)管(guan)(guan)0.07—0.09（隨密度(du)大小變化），10毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)試(shi)(shi)管(guan)(guan)加(jia)營(ying)(ying)養(yang)液(ye)7毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，藻種(zhong)(zhong)0.5毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，20毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)試(shi)(shi)管(guan)(guan)中營(ying)(ying)養(yang)液(ye)加(jia)12.5毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)(ying)養(yang)液(ye)，1毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)藻種(zhong)(zhong)。B:三角(jiao)(jiao)瓶(ping)(ping)0.09-0.11。在100毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，150毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，200毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，250毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)三角(jiao)(jiao)瓶(ping)(ping)中分別加(jia)營(ying)(ying)養(yang)液(ye)，70，80，120，150毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)（可按一試(shi)(shi)管(guan)(guan)對(dui)(dui)應(ying)一個(ge)三角(jiao)(jiao)瓶(ping)(ping)加(jia)入），C: 500毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)（400毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)(ying)養(yang)液(ye)）(按1個(ge)三角(jiao)(jiao)瓶(ping)(ping)對(dui)(dui)應(ying)1個(ge)500毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)加(jia)入)D:2.5升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)（2升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)(ying)養(yang)液(ye)）（按1個(ge)500毫(hao)(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)對(dui)(dui)應(ying)1個(ge)2.5升(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)加(jia)入），注意(yi)：上述若發現藻生長情況不好，需要先鏡檢，判斷后再決定是否(fou)接種(zhong)(zhong)。
一般(ban)情況下3袋(dai)(dai)二級(ji)藻(zao)種應先擴培接種于容量(liang)400升(sheng)的桶(tong)（海水貯備及營(ying)養(yang)液提(ti)前配(pei)置好），然后立即進(jin)行二級(ji)藻(zao)袋(dai)(dai)擴種，每個聚乙烯袋(dai)(dai)加18升(sheng)左右藻(zao)水。
4、保種培養(yang)基制(zhi)備(bei)：按1.5%的(de)比例加瓊脂(zhi)粉，煮沸后加營養(yang)鹽（母液千分之1添加），高(gao)壓滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)。維生素需高(gao)壓滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)后培養(yang)基冷卻至30攝(she)氏度方可加入。（可用劃(hua)線法，涂布法等分離培養(yang)藻(zao)種）。
5、儀器的清洗維護。溶劑(ji)過濾器使用(yong)后只(zhi)用(yong)洗潔(jie)精和清水清洗。高壓滅菌后備(bei)用(yong)。其它玻(bo)璃(li)儀器，氣(qi)管(guan)，氣(qi)石，移(yi)液槍筒使用(yong)后需要(yao)浸(jin)泡(pao)在百(bai)分(fen)之一(yi)到(dao)百(bai)分(fen)之十的稀(xi)鹽酸溶液中至(zhi)少(shao)半天，才能拿出清洗，風干，高壓滅菌后備(bei)用(yong)。
說明：10的(de)2次方(fang)標示成(cheng)10^2，以下數(shu)字的(de)次方(fang)通(tong)用(yong)此表(biao)示法
三級藻生產
三(san)級藻(zao)(zao)系統包(bao)括用水處理以及配送(song)，溫度與光照控制，藻(zao)(zao)種的(de)供應等。為(wei)確保擴大培養成功，從(cong)接種到收獲的(de)培養時間應該盡量縮短，以避免因為(wei)開放式培養隨培養規模(mo)擴大接觸外界感染(ran)源時間加長，三(san)級藻(zao)(zao)池滋生過多的(de)有(you)害(hai)生物，使三(san)級培養失敗。
1—1高水位低密度接(jie)種（接(jie)種密度為P×10^4cell/ml,P為接(jie)種密度萬位數值）（未(wei)特別說(shuo)明(ming)藻水藻細胞密度就是cell/ml）（以(yi)下的推(tui)理是建立在三級藻第二次加水和(he)收獲(huo)的密度為105級）
若一(yi)天三級(ji)濃(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求(qiu)量(liang)為A升(sheng)，則(ze)總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)為K=A×10^3×（B×10^7）cell(K為A升(sheng)濃(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)值，B為濃(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)(du)千萬(wan)(wan)(wan)位(wei)的(de)(de)數(shu)(shu)(shu)(shu)值),一(yi)般(ban)情況下(xia)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)(de)密(mi)度(du)(du)為C×10^6cell/ml(C為二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)(du)百萬(wan)(wan)(wan)位(wei)的(de)(de)數(shu)(shu)(shu)(shu)值),若第(di)一(yi)天接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)，則(ze)一(yi)天需(xu)要二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×104/C×10^6=EP×10/C升(sheng)，第(di)三天加(jia)水(shui)F噸，此時(shi)加(jia)水(shui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為第(di)三天加(jia)F噸水(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)(du)十萬(wan)(wan)(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu)值），然(ran)后(hou)第(di)五天收獲(huo)時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)應為H=（E+F）×10^5×Z×10^6(Z為藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)(du)十萬(wan)(wan)(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu),H為藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu))，因為總(zong)需(xu)求(qiu)量(liang)的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)應等于最(zui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)，則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F）×10^6×Z×10^5經過計(ji)算(suan)是A×B=(E+F)×10×Z。
舉例
若一天(tian)需(xu)濃(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)320升(sheng)，則(ze)A=320，(一般情(qing)況(kuang)下(xia)E和F的(de)值接近(jin))，則(ze)因為(wei)K=H,所以320×B=20EZ,即(ji)320B=20EZ，E=16B/Z,即(ji)B/Z噸(dun)藻(zao)池(chi)(chi)藻(zao)水可以收集(ji)濃(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)20升(sheng)(B為(wei)濃(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)密(mi)度(du)千萬位的(de)數值,Z為(wei)藻(zao)池(chi)(chi)藻(zao)水密(mi)度(du)十萬位數)，即(ji)若一天(tian)需(xu)要濃(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)A升(sheng)，則(ze)每天(tian)應接種(zhong)E=AB÷20Z噸(dun)水。（Z和B的(de)值應經過三(san)級培養和收集(ji)藻(zao)水后(hou)才知道近(jin)似數值）。
1—2高水位(wei)低密(mi)(mi)度接(jie)(jie)種（接(jie)(jie)種密(mi)(mi)度為P×10^4cell/ml,P為接(jie)(jie)種密(mi)(mi)度萬位(wei)數值）（未(wei)特別(bie)說明的藻(zao)水藻(zao)細(xi)胞密(mi)(mi)度就是cell/ml）（以下(xia)的推理是建立在三級(ji)藻(zao)第二次加(jia)水和(he)收獲密(mi)(mi)度為10^6級(ji)）。
若(ruo)一(yi)天(tian)三(san)級(ji)(ji)(ji)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求(qiu)量(liang)為A升(sheng)，則(ze)總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)(mu)為K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為A升(sheng)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含(han)的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數(shu)(shu)(shu)(shu)值，B為濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)千萬位的數(shu)(shu)(shu)(shu)值),一(yi)般情況下(xia)二(er)級(ji)(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的密(mi)度(du)為C×10^6cell/ml(C為二(er)級(ji)(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)百(bai)萬位的數(shu)(shu)(shu)(shu)值),若(ruo)一(yi)天(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)，則(ze)一(yi)天(tian)需要二(er)級(ji)(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^4/C×10^6=EP×10/C升(sheng)，第三(san)天(tian)加(jia)水(shui)(shui)(shui)F噸，此(ci)時加(jia)水(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6 cell/ml（Y為第三(san)天(tian)加(jia)F噸水(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)百(bai)萬位數(shu)(shu)(shu)(shu)值），然后第五天(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)(mu)應為H=（E+F）×10^6×Z×10^6 (Z為藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)百(bai)萬位數(shu)(shu)(shu)(shu),H為藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)(mu))，因為總(zong)需求(qiu)量(liang)的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)(mu)應等(deng)于最(zui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)(mu)，則(ze)K=H,則(ze) A×10^3×B×10^7 =（E+F）×10^6×Z×10^6經(jing)過計算是A×B=(E+F) ×100×Z, (一(yi)般情況下(xia)E和F的值接近)，則(ze)近似AB=200EZ, 即若(ruo)一(yi)天(tian)需要濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升(sheng)，則(ze)每(mei)天(tian)應接種E=AB÷200Z噸水(shui)(shui)(shui)。（Z和B的值應經(jing)過三(san)級(ji)(ji)(ji)培養和收集藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)后才知道近似數(shu)(shu)(shu)(shu)值）。
2—1低水(shui)(shui)位高密(mi)度接種(zhong)（接種(zhong)密(mi)度為P×10^5cell/ml,P為接種(zhong)密(mi)度十萬(wan)位數值）（未特(te)別說(shuo)明藻(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)細(xi)胞密(mi)度就(jiu)是cell/ml）（以下的(de)推理是建立在(zai)三(san)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)第二次(ci)，第三(san)次(ci)加水(shui)(shui)和收(shou)獲的(de)密(mi)度為105級(ji)(ji)）。
若(ruo)一(yi)(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)三級濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求量(liang)為(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)，則(ze)總藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)目(mu)為(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)(du)千萬(wan)位(wei)(wei)的數(shu)(shu)(shu)值(zhi)),一(yi)(yi)(yi)般(ban)情(qing)況(kuang)下二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)的密(mi)度(du)(du)為(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)(du)百(bai)萬(wan)位(wei)(wei)的數(shu)(shu)(shu)值(zhi)),若(ruo)第(di)一(yi)(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)接種(zhong)E噸(dun)(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)，則(ze)一(yi)(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)需(xu)要二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升(sheng)，第(di)二天(tian)(tian)(tian)加(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)F噸(dun)(dun)，此時加(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)第(di)二天(tian)(tian)(tian)加(jia)F噸(dun)(dun)水(shui)(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)(du)十萬(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)），然(ran)后第(di)三天(tian)(tian)(tian)加(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)G噸(dun)(dun)時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)密(mi)度(du)(du)應(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^5/(E+F+G)×10^6(Z為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)(du)十萬(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu)(shu))，第(di)四天(tian)(tian)(tian)或第(di)五天(tian)(tian)(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)(shu)(shu)目(mu)應(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^5(W為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)(du)十萬(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu)(shu),H為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)(shu)(shu)目(mu))，因為(wei)(wei)(wei)(wei)總需(xu)求量(liang)的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)目(mu)應(ying)等于最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)(shu)(shu)目(mu)。
則K=H,則A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^5經過計算是A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一般情(qing)況下E,F,G的值(zhi)接(jie)近)，則(ze)近似AB=30EW, 即若一天需要濃縮藻A升，則(ze)每天應(ying)接(jie)種(zhong)E=AB÷30W噸水。（W和B的值(zhi)應(ying)經(jing)過三級培養和收集藻水后才知(zhi)道(dao)近似數(shu)值(zhi)）。
2—2低水(shui)位(wei)(wei)高(gao)密度(du)(du)接(jie)種（接(jie)種密度(du)(du)為P×10^5cell/ml,P為接(jie)種密度(du)(du)十萬(wan)位(wei)(wei)數(shu)值(zhi)）（未特別說明藻(zao)水(shui)藻(zao)細胞密度(du)(du)就是cell/ml）（以下的(de)推理是建立在三(san)級(ji)藻(zao)第二次，第三(san)次加水(shui)和(he)收獲的(de)密度(du)(du)為10^6級(ji)）。
若(ruo)(ruo)一(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)三級濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求量為(wei)(wei)A升(sheng)(sheng)，則(ze)(ze)總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目為(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)A升(sheng)(sheng)濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)所含(han)的藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)，B為(wei)(wei)濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)(du)千萬(wan)位(wei)(wei)的數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)),一(yi)(yi)般情況(kuang)下二(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)的密(mi)(mi)度(du)(du)為(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)二(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)(du)百萬(wan)位(wei)(wei)的數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)),若(ruo)(ruo)一(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)接種(zhong)E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)，則(ze)(ze)一(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)需(xu)要二(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升(sheng)(sheng)，第(di)二(er)(er)天(tian)(tian)(tian)加(jia)(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)F噸，此時(shi)加(jia)(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)第(di)二(er)(er)天(tian)(tian)(tian)加(jia)(jia)(jia)F噸水(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)百萬(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)），然后第(di)三天(tian)(tian)(tian)加(jia)(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)G噸時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)密(mi)(mi)度(du)(du)應為(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^6/(E+F+G) ×10^6 (Z為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)百萬(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu))，第(di)四(si)天(tian)(tian)(tian)或第(di)五天(tian)(tian)(tian)收(shou)獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目應為(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^6 (W為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)百萬(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu),H為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目)，因為(wei)(wei)總(zong)需(xu)求量的藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目應等于(yu)最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目，則(ze)(ze)K=H,則(ze)(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^6經(jing)(jing)過計(ji)算(suan)是A×B=(E+F+G) ×10×W。(一(yi)(yi)般情況(kuang)下E,F,G的值(zhi)(zhi)接近)，則(ze)(ze)近似AB=300EW, 即若(ruo)(ruo)一(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)需(xu)要濃(nong)(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)A升(sheng)(sheng)，則(ze)(ze)每天(tian)(tian)(tian)應接種(zhong)E=AB÷300W噸水(shui)(shui)(shui)。（W和(he)(he)B的值(zhi)(zhi)應經(jing)(jing)過實地三級培養和(he)(he)收(shou)集藻(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)后才(cai)知道近似數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)）。
