對(dui)蝦(xia)(xia)種苗(miao)(miao)企業(ye)的(de)(de)(de)生存主要是(shi)依(yi)靠蝦(xia)(xia)苗(miao)(miao)養殖效果來決定(ding)的(de)(de)(de)，蝦(xia)(xia)苗(miao)(miao)成(cheng)活率的(de)(de)(de)高(gao)(gao)低直接影響著產業(ye)鏈的(de)(de)(de)上上下下。單(dan)胞(bao)藻對(dui)于(yu)蝦(xia)(xia)苗(miao)(miao)早(zao)期是(shi)最適合(he)(he)的(de)(de)(de)餌(er)料(liao)，如(ru)(ru)果培(pei)育得當(dang)(dang)(dang)，不僅可以節約成(cheng)本，減少育苗(miao)(miao)水體環境負(fu)荷，尤其是(shi)對(dui)于(yu)蝦(xia)(xia)苗(miao)(miao)的(de)(de)(de)發育打下堅實(shi)的(de)(de)(de)基礎，提高(gao)(gao)成(cheng)活率。結合(he)(he)個(ge)人的(de)(de)(de)育苗(miao)(miao)感(gan)受，投(tou)(tou)喂單(dan)胞(bao)藻與不投(tou)(tou)喂的(de)(de)(de)區(qu)別還(huan)是(shi)有的(de)(de)(de)，比如(ru)(ru)苗(miao)(miao)的(de)(de)(de)變態時間縮(suo)短，活力個(ge)頭大(da)小(xiao)，水質均優(you)于(yu)未投(tou)(tou)喂單(dan)胞(bao)藻的(de)(de)(de)苗(miao)(miao)，當(dang)(dang)(dang)然如(ru)(ru)果培(pei)育不得當(dang)(dang)(dang)，反作用也有，比如(ru)(ru)投(tou)(tou)喂有害(hai)菌(jun)超標的(de)(de)(de)藻液，藻類(lei)老化，投(tou)(tou)喂過量等。所(suo)以合(he)(he)理運用，方可收到(dao)理想效果。限于(yu)個(ge)人水平，描述方法的(de)(de)(de)錯誤不足之處，懇請大(da)家指正。
一 、單胞藻純培養室操作描述
儀器使用
（1） 超凈工作(zuo)臺
使用前(qian)提(ti)前(qian)開機，打開紫外線(xian)燈和風機開關(guan)20分鐘。超凈(jing)(jing)臺(tai)(tai)面上不(bu)存放(fang)不(bu)必要(yao)的物品，保持工(gong)作(zuo)區(qu)內的凈(jing)(jing)化氣(qi)流不(bu)受(shou)干擾，工(gong)作(zuo)時(shi)盡(jin)量避免作(zuo)明顯干擾氣(qi)流的動(dong)作(zuo)；超凈(jing)(jing)臺(tai)(tai)保持光(guang)(guang)滑水平，光(guang)(guang)滑便于用酒精(jing)消毒(du)布擦，水平是倒培(pei)(pei)養基時(shi)使培(pei)(pei)養皿內平板厚度一致(zhi)。工(gong)作(zuo)時(shi)超凈(jing)(jing)臺(tai)(tai)周(zhou)圍空(kong)氣(qi)流動(dong)要(yao)緩慢，雜菌(jun)盡(jin)量減少(shao)，所以要(yao)定(ding)期清(qing)潔(jie)消毒(du)保種室內，關(guan)閉門窗，盡(jin)可能(neng)減少(shao)雜菌(jun)數(shu)量；空(kong)氣(qi)過濾(lv)網定(ding)期清(qing)潔(jie)。
（2）真(zhen)空泵和溶劑過(guo)濾(lv)器(qi)及過(guo)濾(lv)膜
此(ci)環(huan)節(jie)過濾(lv)只是為單胞(bao)藻純培(pei)養(yang)(yang)室(shi)（保種，提純，擴培(pei)試管(guan)級）準備清潔無(wu)菌海水。其他(ta)級別的培(pei)養(yang)(yang)無(wu)需此(ci)環(huan)節(jie)。
過(guo)(guo)濾膜使用0.2微米孔徑，不可(ke)用手拿，用鑷子選取。真(zhen)空泵(beng)與溶劑過(guo)(guo)濾器之(zhi)間(jian)通(tong)過(guo)(guo)合適口徑的橡膠管連接緊密，每(mei)次過(guo)(guo)濾要(yao)注意濾膜的過(guo)(guo)濾效(xiao)果，防止濾孔阻塞影(ying)響過(guo)(guo)濾效(xiao)果。濾瓶內的濾液不能(neng)沒過(guo)(guo)濾板(ban)出水口，否則濾液將被(bei)抽吸入真(zhen)空泵(beng)，導(dao)致真(zhen)空泵(beng)損壞。
應該使(shi)濾板內(nei)的營(ying)養液過濾盡后（無水滴）才能停泵。要定(ding)期(qi)注意真空泵內(nei)油(you)量，注意加(jia)油(you)。
(3) 恒溫鼓風干燥箱
設(she)(she)定(ding)溫(wen)(wen)(wen)度(du)時(shi)(shi)。先(xian)按(an)(an)控溫(wen)(wen)(wen)儀功(gong)能(neng)鍵SET進(jin)入(ru)(ru)溫(wen)(wen)(wen)度(du)設(she)(she)定(ding)狀態，此時(shi)(shi)SP設(she)(she)定(ding)顯(xian)示(shi)一(yi)閃(shan)一(yi)閃(shan)，要按(an)(an)移動(dong)位(wei)鍵配合加鍵或減(jian)鍵，設(she)(she)定(ding)時(shi)(shi)先(xian)從分位(wei)數字(zi)設(she)(she)定(ding)，一(yi)直到百位(wei)數，設(she)(she)定(ding)結束(shu)需按(an)(an)一(yi)下功(gong)能(neng)鍵SET,此時(shi)(shi)干燥箱進(jin)入(ru)(ru)升溫(wen)(wen)(wen)狀態，加熱指示(shi)燈亮，當箱內溫(wen)(wen)(wen)度(du)接近設(she)(she)定(ding)溫(wen)(wen)(wen)度(du)時(shi)(shi)，加熱指示(shi)燈閃(shan)動(dong)多次，控制進(jin)入(ru)(ru)恒溫(wen)(wen)(wen)狀態。
使用注意事(shi)項：物品不(bu)能堆得(de)太滿，更(geng)不(bu)能堵住出(chu)風口(kou)，以免影響溫(wen)(wen)度(du)(du)(du)均勻上(shang)升(sheng)。若是有牛皮紙和保鮮膜時，溫(wen)(wen)度(du)(du)(du)不(bu)能超過(guo)180度(du)(du)(du)。取出(chu)物品時，箱內外溫(wen)(wen)差不(bu)宜過(guo)高，防(fang)止玻璃器皿炸裂。橡膠制品不(bu)能放入(ru)。
（4）加濕(shi)器
配合生化培(pei)養箱使用(yong)。
水(shui)源(yuan)是蒸餾水(shui)；不應容(rong)器(qi)內帶水(shui)移動加濕器(qi)；加水(shui)時應在(zai)容(rong)器(qi)上表示的滿水(shui)線為止。
應注意的事項：平時留意觀察水箱(xiang)的存水量(liang)，及時予以(yi)補(bu)充，遠離熱(re)源(yuan)，腐蝕物。
（5）蒸汽消毒器
容器加水時，水位一(yi)定(ding)要超(chao)過電熱管(guan)，最好是到3個支撐點的(de)下緣，如果連續使用，應在(zai)每次(ci)(ci)消(xiao)毒前補足蒸(zheng)發水量，不然少水會(hui)燒壞電熱管(guan)。蓋上的(de)放氣(qi)軟管(guan)插入消(xiao)毒桶(tong)圓槽(cao)內，對正蓋和(he)主體(ti)的(de)螺栓(shuan)槽(cao)，依次(ci)(ci)將(jiang)相對方(fang)的(de)翼(yi)型螺母予(yu)以旋緊，使蓋與主體(ti)密合，加熱開始(shi)時，應將(jiang)放氣(qi)閥與安全閥的(de)小手柄(bing)扳(ban)至垂直放氣(qi)方(fang)位，必須待有較急蒸(zheng)汽(qi)噴(pen)出，即(ji)將(jiang)小手柄(bing)扳(ban)回水平(ping)“關閉”方(fang)位。
當到達(da)所需壓力和溫(wen)度，計(ji)算消(xiao)毒時間，消(xiao)毒畢后(hou)，關閉電(dian)源，待壓力指針指向(xiang)0時，將放氣(qi)閥的小手柄扳至垂(chui)直放氣(qi)方(fang)位，氣(qi)放完(wan)后(hou)，打(da)開容(rong)器蓋。物品消(xiao)毒后(hou)要迅速干燥。
應注(zhu)意滅菌(jun)液體(ti)時(shi)，不(bu)超過盛液體(ti)容器體(ti)積的(de)(de)3/4，瓶塞(sai)不(bu)可用軟木(mu)塞(sai)或未打(da)孔(kong)的(de)(de)橡(xiang)膠塞(sai)。滅菌(jun)器內冷空(kong)(kong)(kong)氣(qi)必(bi)須完全(quan)(quan)排除。因為空(kong)(kong)(kong)氣(qi)的(de)(de)膨(peng)脹壓(ya)大于(yu)水蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)的(de)(de)膨(peng)脹壓(ya)，當水蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)含冷空(kong)(kong)(kong)氣(qi)時(shi)，壓(ya)力(li)表所(suo)表示的(de)(de)壓(ya)力(li)是水蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)壓(ya)力(li)和部分冷空(kong)(kong)(kong)氣(qi)壓(ya)力(li)之(zhi)和，不(bu)是水蒸(zheng)(zheng)(zheng)氣(qi)的(de)(de)實際壓(ya)力(li)，而(er)同一壓(ya)力(li)下的(de)(de)實際溫度，含空(kong)(kong)(kong)氣(qi)的(de)(de)蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽低于(yu)飽和蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽，這樣導(dao)致(zhi)達不(bu)了消毒(du)效果。絕不(bu)可堵塞(sai)安(an)全(quan)(quan)閥出氣(qi)孔(kong)，必(bi)須留(liu)空(kong)(kong)(kong)位保證其暢通放氣(qi)，發現超溫超壓(ya)，立即斷電。
蒸餾器
先關(guan)閉放水(shui)閥(fa)，打開進(jin)水(shui)閥(fa)，待溢水(shui)皮(pi)管有水(shui)流出(chu)，方可(ke)接通電源，此時可(ke)暫時關(guan)閉進(jin)水(shui)閥(fa)，待出(chu)水(shui)皮(pi)管有蒸餾(liu)水(shui)流出(chu)，打開進(jin)水(shui)閥(fa)，制備蒸餾(liu)水(shui)。定期清洗蒸餾(liu)器內壁，除去水(shui)垢(gou)，不然影(ying)響蒸餾(liu)水(shui)質量和使用效果。切不可(ke)關(guan)閉水(shui)閥(fa)制備蒸餾(liu)水(shui)，否則燒(shao)壞(huai)電熱管。
（6）鼓風機
定期更換吸(xi)氣(qi)口(kou)的(de)過(guo)濾棉，異常情(qing)況，請電工檢查。
（7）空調
保種室若(ruo)有生長藻種，需(xu)維持恒定(ding)溫度，反之關閉(bi)。一級(ji)，二級(ji)空調(diao)視外界氣溫調(diao)整(zheng)開關。
二 、衛生消毒
工具衛生消毒
1、濾(lv)水筒式(shi)過(guo)濾(lv)器。筒式(shi)過(guo)濾(lv)器的(de)濾(lv)芯(xin)應(ying)用一次更(geng)換一次，用過(guo)的(de)濾(lv)芯(xin)浸泡在1%鹽酸溶液中消毒12h以上。然后用洗潔精清洗，再用足量清水沖洗干凈，晾(liang)干備(bei)用。（濾(lv)芯(xin)規格應(ying)小于等于0.5微米）。
2、試(shi)管(guan)(guan)（規格10毫(hao)升(sheng)到20毫(hao)升(sheng)），錐形(xing)瓶(ping)（50毫(hao)升(sheng)到200毫(hao)升(sheng)），500ml錐形(xing)瓶(ping)，2.5L瓶(ping)廣口瓶(ping)，移液管(guan)(guan)，移液槍管(guan)(guan)/盒，玻璃氣(qi)(qi)管(guan)(guan)，膠(jiao)氣(qi)(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)(qi)石，溶劑(ji)(ji)過(guo)(guo)濾器(qi)，培養皿(min)。用(yong)過(guo)(guo)后(hou)(hou)應當用(yong)清(qing)水(shui)清(qing)洗(xi)后(hou)(hou)浸(jin)泡(pao)于1% 鹽酸12h以上（溶劑(ji)(ji)過(guo)(guo)濾器(qi)除(chu)外(wai)，浸(jin)泡(pao)時(shi)相近大小器(qi)皿(min)分(fen)類放不同的消毒桶，規格相差大，易導致(zhi)相互碰撞碎爛）然后(hou)(hou)用(yong)洗(xi)潔(jie)精清(qing)洗(xi)(用(yong)毛刷清(qing)洗(xi)試(shi)管(guan)(guan)底部時(shi)，不可太用(yong)力(li)，否則底部易破(po)裂(lie))，再用(yong)大量(liang)清(qing)水(shui)沖洗(xi)干(gan)凈，風干(gan)或曬干(gan)，高(gao)壓(ya)滅菌后(hou)(hou)，放入恒溫干(gan)燥(zao)箱（膠(jiao)氣(qi)(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)(qi)石除(chu)外(wai)）干(gan)燥(zao)備用(yong)。
3、聚乙烯藻(zao)袋用(yong)于(yu)二(er)級藻(zao)類藻(zao)種掛(gua)袋培(pei)養或(huo)3級擴培(pei)（一般使用(yong)盛裝藻(zao)液12升(sheng)左右）。先用(yong)清(qing)水(shui)沖洗干凈內外，浸泡于(yu)1% 鹽酸12h以上，再用(yong)大量清(qing)水(shui)沖洗干凈，風干或(huo)曬干，備用(yong)。由于(yu)藻(zao)袋近似密(mi)封(feng)性(xing)，對(dui)于(yu)防止微(wei)生(sheng)物污染有很好(hao)的效果(guo)。
4、毛(mao)巾、保種室(shi)，一級(ji)和二(er)級(ji)毛(mao)巾不可(ke)混用，所用毛(mao)巾后都應消毒(du)清(qing)洗晾(liang)干后備用。
5、錫箔(bo)紙：除非(fei)粘上油污(wu)或污(wu)物以(yi)及破(po)損，都應重復使用。
6、牛皮紙：定期拿(na)到烘箱烘干。
7、定期更換(huan)空氣過濾器（用于1，2級培養的(de)進(jin)氣過濾）的(de)濾芯(xin)，濾芯(xin)已(yi)油化或沖散的(de)棄去(qu)。
8、定期更換鼓風(feng)機進風(feng)口(kou)的過(guo)濾棉。
9、對(dui)新購(gou)入的器皿應先除去包裝(zhuang)沾(zhan)染的污垢后，用洗潔(jie)精刷洗，流水沖凈，再浸泡于1%的鹽酸12h，使游離的堿性(xing)物質(zhi)除去，再用清水沖洗干凈，風干或曬干備用。
室內衛生消毒
1、保種室每天早上用清水擦洗實驗臺面，地(di)板，墻壁(bi)，木架后(hou)，開紫外(wai)燈(deng)消(xiao)毒(du)20分(fen)鐘，此時關(guan)掉空調(diao)，關(guan)掉日光燈(deng)，由(you)于(yu)紫外(wai)燈(deng)照射(she)會產生一(yi)定量(liang)的臭氧(yang)，對人體有害，所以消(xiao)毒(du)關(guan)閉紫外(wai)燈(deng)后(hou)人應隔(ge)一(yi)段時間再(zai)進(jin)去。進(jin)保種室換(huan)鞋。
2、一級(ji)和(he)二級(ji)室(shi)每天清潔，接種(zhong)前接種(zhong)后承載物框架都應用消(xiao)毒液消(xiao)毒。
3、門口消毒池定期更換消毒藥(yao)水（高錳酸鉀）。
4、常(chang)用消毒劑濃度(du) 1%鹽酸，次氯(lv)酸鈉20ppm（有效氯(lv)），碘液(ye)（1000ppm）,酒精70-75%,高錳酸鉀1mg/L。
三 、接種
藻種固體培養基制備
所需燒杯(bei)，玻棒須(xu)清(qing)洗(xi)干凈(jing)，錐形瓶(ping)和培(pei)(pei)養皿須(xu)消毒清(qing)洗(xi)滅菌(jun)烘(hong)干。將稱(cheng)好的(de)純化(hua)瓊脂粉加(jia)入(ru)燒杯(bei)再(zai)加(jia)入(ru)一定量的(de)海水，加(jia)熱（必須(xu)不(bu)停攪拌，以免瓊脂糊底(di)燒焦(jiao)）至完全融(rong)化(hua)，加(jia)熱后的(de)瓊脂培(pei)(pei)養基應當透(tou)明無顯著沉淀，若明顯，可(ke)采(cai)用清(qing)潔的(de)白色薄(bo)絨布或中間夾有(you)薄(bo)層吸水棉(mian)的(de)雙層紗布鋪在(zai)漏斗上趁熱過濾，融(rong)化(hua)畢后精確加(jia)入(ru)營養鹽（維生素B溶液須(xu)等培(pei)(pei)養基高壓滅菌(jun)后冷卻(que)至50攝氏(shi)度以下再(zai)加(jia)）。
培(pei)養(yang)基(ji)(ji)采(cai)用121攝氏(shi)度(du)(du)高壓蒸汽滅菌20至30分(fen)鐘即(ji)(ji)(ji)可(ke)，培(pei)養(yang)基(ji)(ji)滅菌后(hou)應立即(ji)(ji)(ji)取出，冷卻(que)至50攝氏(shi)度(du)(du)以(yi)下，即(ji)(ji)(ji)加維生素B溶液(ye)。將盛裝(zhuang)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)的錐形瓶和培(pei)養(yang)皿(min)放(fang)(fang)在(zai)超(chao)凈工作臺上，點燃(ran)酒(jiu)精(jing)(jing)燈(deng)，右(you)手托起錐形瓶底，將瓶口在(zai)酒(jiu)精(jing)(jing)燈(deng)稍加燒(shao)，然后(hou)迅(xun)速將培(pei)養(yang)基(ji)(ji)倒(dao)入培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，以(yi)鋪滿皿(min)底為止(zhi)（厚薄(bo)適中(zhong)）。鋪放(fang)(fang)好后(hou)，放(fang)(fang)置20-30分(fen)鐘，待培(pei)養(yang)基(ji)(ji)凝(ning)固后(hou)，即(ji)(ji)(ji)開(kai)始操作。
若是做(zuo)斜(xie)面培養基(ji)，則加(jia)入維生素B溶液后(hou)，將盛裝培養基(ji)的(de)錐形瓶和試(shi)管以及一根厚約1厘(li)米(mi)的(de)小(xiao)木板放(fang)在超凈工作臺上。分(fen)裝約為試(shi)管高度的(de)1/3-2/3（視情況操(cao)作），分(fen)裝量(liang)應(ying)以能形成2/3底層和1/3斜(xie)面量(liang)為好，擺(bai)置(zhi)成適(shi)當(dang)斜(xie)面，待其自然凝固(gu)。培養基(ji)制備好后(hou)，如發現破裂，水分(fen)浸入，色澤異常等均應(ying)棄去.
待(dai)凝固后(hou)即(ji)進行操(cao)作，現一般(ban)采用(yong)平板劃線(xian)接(jie)種和涂布(bu)接(jie)種。
平板劃線接種
接(jie)(jie)種環在(zai)酒(jiu)精(jing)(jing)燈(deng)火焰(yan)上(shang)充分燒紅后，接(jie)(jie)種柄一(yi)邊轉動一(yi)邊慢慢來回(hui)通(tong)過(guo)火焰(yan)3次，待冷卻(que)至(zhi)室溫(wen)方(fang)可(ke)(ke)挑取藻(zao)種（為保證(zheng)藻(zao)種不(bu)(bu)被燙死，挑種前可(ke)(ke)將接(jie)(jie)種環接(jie)(jie)觸培(pei)養(yang)(yang)皿內壁或培(pei)養(yang)(yang)基），迅(xun)速接(jie)(jie)種至(zhi)新培(pei)養(yang)(yang)基（劃線可(ke)(ke)采用斜線法(fa)，方(fang)格法(fa)，曲線法(fa)，放射法(fa)等）。左手握住(zhu)平板(ban)，用大拇指(zhi)和食指(zhi)稍稍抬起皿蓋，同時靠近火焰(yan)周圍(wei)，右手持(chi)接(jie)(jie)種環伸入皿內，在(zai)平板(ban)上(shang)一(yi)個區(qu)域作(zuo)(zuo)(zuo)劃線（依方(fang)法(fa)不(bu)(bu)同，動作(zuo)(zuo)(zuo)不(bu)(bu)同）。劃線時使接(jie)(jie)種環與平板(ban)表(biao)(biao)面成30-40度(du)角輕輕接(jie)(jie)觸，以(yi)腕力(li)在(zai)表(biao)(biao)面作(zuo)(zuo)(zuo)較快的滑動（注意不(bu)(bu)要(yao)劃破平板(ban)表(biao)(biao)面或伸進培(pei)養(yang)(yang)基內）。接(jie)(jie)種環挑種后和劃線完抽出時均(jun)不(bu)(bu)可(ke)(ke)碰及皿壁/口(kou)，更不(bu)(bu)能碰其它(ta)物(wu)體和臺面。接(jie)(jie)種完后，將接(jie)(jie)種環從(cong)柄部至(zhi)環端逐漸通(tong)過(guo)酒(jiu)精(jing)(jing)燈(deng)火焰(yan)滅菌，不(bu)(bu)能直接(jie)(jie)燒環，以(yi)免(mian)殘留在(zai)接(jie)(jie)種環上(shang)的藻(zao)體或菌體爆濺污(wu)染(ran)空(kong)間。上(shang)述操作(zuo)(zuo)(zuo)完成后，即用無(wu)菌封口(kou)膜(mo)封培(pei)養(yang)(yang)皿口(kou)（膜(mo)使用前須用酒(jiu)精(jing)(jing)消毒，紫外燈(deng)消毒，風干），封口(kou)時，用左手大拇指(zhi)摁(en)住(zhu)膜(mo)一(yi)邊末(mo)端，右手大拇指(zhi)和食指(zhi)捏住(zhu)另一(yi)邊末(mo)端，迅(xun)速繞培(pei)養(yang)(yang)皿口(kou)繞一(yi)圈，封口(kou)。
涂布(bu)接種
所用(yong)(yong)種(zhong)液必(bi)須經過弧菌檢測(ce)合格后方可(ke)使(shi)用(yong)(yong)。涂(tu)布(bu)(bu)棒在火(huo)焰上慢(man)慢(man)來回(hui)過火(huo)焰3次，冷卻（不可(ke)驟冷），將種(zhong)液用(yong)(yong)移(yi)液槍從(cong)試管吸出注(zhu)入平板上面(mian)（槍管不可(ke)碰(peng)及試管外壁，更(geng)不能碰(peng)及其它物(wu)品或(huo)臺(tai)面(mian)），迅(xun)速(su)用(yong)(yong)涂(tu)布(bu)(bu)棒在表面(mian)作來回(hui)左(zuo)右(you)的涂(tu)布(bu)(bu)，讓藻液分布(bu)(bu)均勻，畢后，封(feng)口同平板劃線。
試管液體培養基接種
所用種(zhong)液(ye)必須(xu)經過弧菌(jun)(jun)檢測合格后(hou)(hou)方可使(shi)用。火(huo)焰(yan)滅(mie)菌(jun)(jun)前試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)口外壁(bi)不能(neng)有(you)水滴（易導致受熱(re)不均(jun)(jun)而破裂(lie)）,燒試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)口時(shi)(shi)，試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)傾斜45度角，不斷移動試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)，使(shi)試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)口受熱(re)均(jun)(jun)勻，滅(mie)菌(jun)(jun)時(shi)(shi)間3秒左右。滅(mie)菌(jun)(jun)后(hou)(hou)不能(neng)驟冷，防止試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)破裂(lie)。畢后(hou)(hou)，用盛裝(zhuang)營養液(ye)150或(huo)200ml的錐形瓶（也(ye)要(yao)(yao)滅(mie)菌(jun)(jun)瓶口）向試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)中(zhong)傾倒營養液(ye)，每(mei)次只(zhi)能(neng)拿(na)一個試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)（注：若幾個試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)對比(bi)時(shi)(shi)，可以(yi)同時(shi)(shi)拿(na)在(zai)手里，用大拇(mu)指和手掌），倒好后(hou)(hou)，同樣試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)和錐形瓶口滅(mie)菌(jun)(jun)，試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)塞(sai)(sai)(sai)也(ye)要(yao)(yao)滅(mie)菌(jun)(jun)，塞(sai)(sai)(sai)試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)塞(sai)(sai)(sai)時(shi)(shi)不要(yao)(yao)移動試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)迎接塞(sai)(sai)(sai)，以(yi)免(mian)試(shi)(shi)(shi)管(guan)(guan)(guan)在(zai)移動中(zhong)納入可能(neng)含菌(jun)(jun)空氣，火(huo)焰(yan)旁為無菌(jun)(jun)。
所有試管分裝好(hao)后(hou)，即接(jie)種。用(yong)移液(ye)槍(qiang)選(xuan)取(qu)移液(ye)量（試管口滅菌），注入(ru)新培養(yang)(yang)基(ji)，槍(qiang)管不可碰及管外壁，更不能(neng)碰及其它(ta)物品或(huo)臺(tai)面，一(yi)支槍(qiang)管只(zhi)能(neng)和同(tong)一(yi)種液(ye)使(shi)用(yong)，選(xuan)取(qu)另一(yi)試管種液(ye)時必須更換(huan)槍(qiang)頭。接(jie)種畢后(hou)，選(xuan)取(qu)合(he)適光照(zhao)溫度培養(yang)(yang)。由(you)于試管培養(yang)(yang)是(shi)靜置培養(yang)(yang)，而(er)在靜置條件下，藻(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)會聚集在試管底部，且藻(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)周圍會形(xing)成透過(guo)養(yang)(yang)分的屏障，營養(yang)(yang)鹽的攝入(ru)受(shou)阻，光照(zhao)吸收不均(jun)，為(wei)使(shi)營養(yang)(yang)鹽攝入(ru)正(zheng)常，藻(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)受(shou)光均(jun)勻(yun)，需要(yao)定時搖(yao)置試管（手先噴消毒酒精，手腕使(shi)勁搖(yao)，不要(yao)擺臂(bei)，不能(neng)倒置搖(yao)）
三角瓶，500ml瓶，2.5L瓶液體培養基接種
三角瓶(ping)接種需(xu)無菌操作(zuo)。500ml瓶(ping)，2.5L瓶(ping)液(ye)體培養(yang)基接種均在(zai)室(shi)內(nei)衛(wei)生(sheng)條(tiao)件(jian)下操作(zuo)。3種瓶(ping)和所(suo)需(xu)營養(yang)液(ye)及(ji)錫紙，移液(ye)管，洗耳球，氣(qi)管，氣(qi)石均需(xu)經消毒清(qing)洗，滅菌后使用。三角瓶(ping)需(xu)定時搖置，500ml，2.5L瓶(ping)培養(yang)在(zai)通氣(qi)條(tiao)件(jian)下培養(yang)。
二級聚乙烯藻袋液體培養基接種
氣(qi)(qi)管(guan)，氣(qi)(qi)石均需經消毒清洗，滅菌后使用(yong)(yong)(yong)(yong)，抽(chou)藻(zao)管(guan)前次用(yong)(yong)(yong)(yong)畢(bi)后應當(dang)(dang)用(yong)(yong)(yong)(yong)水(shui)(shui)泵將管(guan)內灌滿消毒鹽酸溶液(ye)，今(jin)次用(yong)(yong)(yong)(yong)前需用(yong)(yong)(yong)(yong)海水(shui)(shui)或(huo)淡水(shui)(shui)沖洗干(gan)凈后使用(yong)(yong)(yong)(yong)。選取的(de)(de)(de)種液(ye)應當(dang)(dang)是無(wu)明顯沉(chen)淀，泡沫，原(yuan)生動物，附著物，色澤正常(chang)，藻(zao)細胞密度(du)大，形態正常(chang)，弧菌檢測合(he)格后選用(yong)(yong)(yong)(yong)。所(suo)用(yong)(yong)(yong)(yong)海水(shui)(shui)漂(piao)白(bai)水(shui)(shui)消毒有效(xiao)氯(lv)應足10ppm，曝(pu)氣(qi)(qi)12小(xiao)時，檢測余氯(lv)，加(jia)硫(liu)代(dai)硫(liu)酸鈉中和，方可使用(yong)(yong)(yong)(yong)。若使用(yong)(yong)(yong)(yong)稀釋(shi)的(de)(de)(de)漂(piao)白(bai)水(shui)(shui)，應當(dang)(dang)天配制當(dang)(dang)天使用(yong)(yong)(yong)(yong)，而(er)未使用(yong)(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)要在24小(xiao)時后棄去。且(qie)稀釋(shi)的(de)(de)(de)漂(piao)白(bai)水(shui)(shui)必須加(jia)蓋(gai)放在避光(guang)的(de)(de)(de)容器內保存(cun)。由于漂(piao)白(bai)水(shui)(shui)會隨時間漸(jian)漸(jian)分(fen)解，一次性購入的(de)(de)(de)漂(piao)白(bai)水(shui)(shui)不(bu)應太多(duo)，不(bu)要過量儲(chu)存(cun)，以免影響滅菌功效(xiao)。
1,2，3級接藻示意
試管→三角瓶→500ml瓶子(zi)→2500ml瓶子(zi)→20升的(de)藻(zao)(zao)(zao)種聚乙烯(xi)(xi)袋 →18升的(de)擴培(pei)藻(zao)(zao)(zao)聚乙烯(xi)(xi)袋或者培(pei)藻(zao)(zao)(zao)池
相關說明
1、母液的配置可(ke)以(yi)參考教科書(shu)上所(suo)寫，然后(hou)結合當地的水質適當修(xiu)改即可(ke)。氮，磷，鐵元(yuan)素(su)(su)，維生(sheng)素(su)(su)B1,B12是(shi)(shi)必須使用,維生(sheng)素(su)(su)母液保(bao)存于低溫弱光環境下，其中維生(sheng)素(su)(su)的添加需要(yao)先高壓滅(mie)菌后(hou)再加入母液中。其余營養鹽先配置好后(hou)，再滅(mie)菌。如果(guo)是(shi)(shi)硅(gui)藻(zao)類，還應加上硅(gui)酸鈉。
2、保種室所需營(ying)養液（母液千分之(zhi)0.8的比例添加）除(chu)需高壓(ya)滅菌外(wai)還必須(xu)經過真空(kong)泵抽濾(lv)后才能用(yong)，微(wei)(wei)孔(kong)濾(lv)膜(mo)直(zhi)徑為50毫米，孔(kong)徑為0.2微(wei)(wei)米。
3、接(jie)種(zhong)(zhong)比(bi)例A:試(shi)(shi)管0.07—0.09（隨密度大(da)小(xiao)變(bian)化），10毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)試(shi)(shi)管加營養液7毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，藻(zao)種(zhong)(zhong)0.5毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，20毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)試(shi)(shi)管中營養液加12.5毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)營養液，1毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)藻(zao)種(zhong)(zhong)。B:三(san)(san)角瓶(ping)0.09-0.11。在100毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，150毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，200毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，250毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)三(san)(san)角瓶(ping)中分別(bie)加營養液，70，80，120，150毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)（可按一試(shi)(shi)管對應一個(ge)三(san)(san)角瓶(ping)加入(ru)），C: 500毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)（400毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)營養液）(按1個(ge)三(san)(san)角瓶(ping)對應1個(ge)500毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)加入(ru))D:2.5升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)（2升(sheng)(sheng)(sheng)營養液）（按1個(ge)500毫(hao)(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)對應1個(ge)2.5升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)加入(ru)），注意：上述(shu)若發(fa)現藻(zao)生長情(qing)況不好(hao)，需(xu)要先鏡檢，判(pan)斷后再決定是(shi)否接(jie)種(zhong)(zhong)。
一般(ban)情況下(xia)3袋二級藻(zao)種應先擴培接(jie)種于容量400升(sheng)的(de)桶（海水貯備及營(ying)養液提前配置好），然后(hou)立即(ji)進行(xing)二級藻(zao)袋擴種，每個聚乙烯袋加18升(sheng)左右藻(zao)水。
4、保種(zhong)培養(yang)(yang)基制備(bei)：按1.5%的比例加瓊脂粉，煮沸后(hou)加營養(yang)(yang)鹽（母液千分之1添加），高壓滅菌。維生素需(xu)高壓滅菌后(hou)培養(yang)(yang)基冷(leng)卻至(zhi)30攝氏(shi)度方可加入。（可用劃線法，涂(tu)布法等分離培養(yang)(yang)藻種(zhong)）。
5、儀器的清洗(xi)維護(hu)。溶(rong)劑過濾器使用(yong)(yong)后(hou)(hou)只(zhi)用(yong)(yong)洗(xi)潔精和清水(shui)清洗(xi)。高壓滅菌后(hou)(hou)備用(yong)(yong)。其它玻璃(li)儀器，氣管，氣石，移液槍筒使用(yong)(yong)后(hou)(hou)需要浸(jin)泡在百(bai)分(fen)(fen)之一到百(bai)分(fen)(fen)之十(shi)的稀(xi)鹽(yan)酸(suan)溶(rong)液中(zhong)至少半天(tian)，才能拿出清洗(xi)，風干，高壓滅菌后(hou)(hou)備用(yong)(yong)。
說明：10的(de)2次(ci)方(fang)標示成10^2，以下數字的(de)次(ci)方(fang)通用此表示法
三級藻生產
三級藻系統包括用水(shui)處理以及配送(song)，溫度與(yu)光照控制，藻種的供應等。為(wei)確保(bao)擴大(da)培(pei)養(yang)成功，從接種到收(shou)獲的培(pei)養(yang)時間應該盡(jin)量(liang)縮短，以避免因為(wei)開放(fang)式(shi)培(pei)養(yang)隨培(pei)養(yang)規模擴大(da)接觸外界(jie)感染源(yuan)時間加長(chang)，三級藻池(chi)滋(zi)生過多的有害生物，使(shi)三級培(pei)養(yang)失敗。
1—1高水(shui)位低(di)密(mi)度接種（接種密(mi)度為(wei)P×10^4cell/ml,P為(wei)接種密(mi)度萬位數值）（未特別說(shuo)明(ming)藻水(shui)藻細胞(bao)密(mi)度就(jiu)是cell/ml）（以下的推理是建(jian)立在三(san)級(ji)藻第二次加(jia)水(shui)和收獲(huo)的密(mi)度為(wei)105級(ji)）
若(ruo)一(yi)天三(san)級(ji)(ji)濃(nong)(nong)縮藻需求量為(wei)(wei)A升，則總藻細胞(bao)數(shu)(shu)目(mu)(mu)(mu)為(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell(K為(wei)(wei)A升濃(nong)(nong)縮藻所含的(de)(de)藻細胞(bao)數(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)濃(nong)(nong)縮藻密(mi)度(du)千萬(wan)位(wei)的(de)(de)數(shu)(shu)值(zhi)),一(yi)般情況下二級(ji)(ji)藻種的(de)(de)密(mi)度(du)為(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)二級(ji)(ji)藻密(mi)度(du)百萬(wan)位(wei)的(de)(de)數(shu)(shu)值(zhi)),若(ruo)第一(yi)天接種E噸藻水(shui)(shui)，則一(yi)天需要二級(ji)(ji)藻種體(ti)積d=E×10^6×P×104/C×10^6=EP×10/C升，第三(san)天加水(shui)(shui)F噸，此時加水(shui)(shui)后(hou)藻水(shui)(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)第三(san)天加F噸水(shui)(shui)之前藻水(shui)(shui)密(mi)度(du)十萬(wan)位(wei)數(shu)(shu)值(zhi)），然后(hou)第五天收獲時，藻池(chi)(chi)藻水(shui)(shui)藻細胞(bao)總數(shu)(shu)目(mu)(mu)(mu)應為(wei)(wei)H=（E+F）×10^5×Z×10^6(Z為(wei)(wei)藻池(chi)(chi)藻水(shui)(shui)密(mi)度(du)十萬(wan)位(wei)數(shu)(shu),H為(wei)(wei)藻池(chi)(chi)藻水(shui)(shui)藻細胞(bao)總數(shu)(shu)目(mu)(mu)(mu))，因(yin)為(wei)(wei)總需求量的(de)(de)藻細胞(bao)數(shu)(shu)目(mu)(mu)(mu)應等于最后(hou)藻池(chi)(chi)藻水(shui)(shui)藻細胞(bao)總數(shu)(shu)目(mu)(mu)(mu)，則K=H,則A×10^3×B×10^7=（E+F）×10^6×Z×10^5經(jing)過(guo)計(ji)算是A×B=(E+F)×10×Z。
舉例
若一(yi)天需(xu)濃縮(suo)藻320升，則A=320，(一(yi)般情(qing)況(kuang)下E和(he)F的(de)(de)值接近(jin))，則因為(wei)K=H,所以320×B=20EZ,即(ji)320B=20EZ，E=16B/Z,即(ji)B/Z噸藻池藻水可以收集(ji)(ji)濃縮(suo)藻20升(B為(wei)濃縮(suo)藻密度(du)千萬(wan)(wan)位(wei)的(de)(de)數值,Z為(wei)藻池藻水密度(du)十萬(wan)(wan)位(wei)數)，即(ji)若一(yi)天需(xu)要濃縮(suo)藻A升，則每天應(ying)(ying)接種(zhong)E=AB÷20Z噸水。（Z和(he)B的(de)(de)值應(ying)(ying)經過三(san)級培養和(he)收集(ji)(ji)藻水后才知道近(jin)似數值）。
1—2高水位低密度(du)接種（接種密度(du)為(wei)P×10^4cell/ml,P為(wei)接種密度(du)萬位數(shu)值）（未特別說(shuo)明的(de)藻水藻細胞密度(du)就是(shi)cell/ml）（以下的(de)推理(li)是(shi)建(jian)立在三級藻第二(er)次加水和(he)收(shou)獲密度(du)為(wei)10^6級）。
若一(yi)(yi)天(tian)(tian)三(san)(san)級(ji)濃(nong)(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求量為(wei)(wei)(wei)A升(sheng)(sheng)(sheng)，則(ze)總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)為(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)A升(sheng)(sheng)(sheng)濃(nong)(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)值，B為(wei)(wei)(wei)濃(nong)(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)千萬位的數(shu)(shu)(shu)(shu)值),一(yi)(yi)般(ban)情況下(xia)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)為(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)百萬位的數(shu)(shu)(shu)(shu)值),若一(yi)(yi)天(tian)(tian)接種E噸(dun)(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)，則(ze)一(yi)(yi)天(tian)(tian)需(xu)要(yao)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^4/C×10^6=EP×10/C升(sheng)(sheng)(sheng)，第三(san)(san)天(tian)(tian)加(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)F噸(dun)(dun)，此時加(jia)水(shui)(shui)(shui)(shui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6 cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)第三(san)(san)天(tian)(tian)加(jia)F噸(dun)(dun)水(shui)(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)百萬位數(shu)(shu)(shu)(shu)值），然后(hou)第五天(tian)(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)應(ying)為(wei)(wei)(wei)H=（E+F）×10^6×Z×10^6 (Z為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)(mi)度(du)(du)(du)(du)百萬位數(shu)(shu)(shu)(shu),H為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu))，因為(wei)(wei)(wei)總(zong)需(xu)求量的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)應(ying)等(deng)于最后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)，則(ze)K=H,則(ze) A×10^3×B×10^7 =（E+F）×10^6×Z×10^6經(jing)過計算是A×B=(E+F) ×100×Z, (一(yi)(yi)般(ban)情況下(xia)E和F的值接近(jin))，則(ze)近(jin)似(si)AB=200EZ, 即若一(yi)(yi)天(tian)(tian)需(xu)要(yao)濃(nong)(nong)(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升(sheng)(sheng)(sheng)，則(ze)每(mei)天(tian)(tian)應(ying)接種E=AB÷200Z噸(dun)(dun)水(shui)(shui)(shui)(shui)。（Z和B的值應(ying)經(jing)過三(san)(san)級(ji)培養和收集藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)后(hou)才知(zhi)道近(jin)似(si)數(shu)(shu)(shu)(shu)值）。
2—1低(di)水位高密(mi)(mi)度(du)接種(zhong)(zhong)（接種(zhong)(zhong)密(mi)(mi)度(du)為P×10^5cell/ml,P為接種(zhong)(zhong)密(mi)(mi)度(du)十萬位數值(zhi)）（未(wei)特別說明(ming)藻(zao)水藻(zao)細(xi)胞密(mi)(mi)度(du)就是cell/ml）（以下的推理是建立在(zai)三(san)(san)級藻(zao)第(di)二次(ci)，第(di)三(san)(san)次(ci)加水和收獲的密(mi)(mi)度(du)為105級）。
若一天(tian)(tian)三級濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求量為(wei)(wei)(wei)A升，則總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數目(mu)為(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)A升濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含(han)的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數值，B為(wei)(wei)(wei)濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密度(du)千萬(wan)位(wei)(wei)的(de)數值),一般情況下二(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)密度(du)為(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)二(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密度(du)百萬(wan)位(wei)(wei)的(de)數值),若第一天(tian)(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水，則一天(tian)(tian)需要二(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第二(er)(er)天(tian)(tian)加(jia)(jia)水F噸，此時(shi)加(jia)(jia)水后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水密度(du)E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)第二(er)(er)天(tian)(tian)加(jia)(jia)F噸水之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水密度(du)十(shi)萬(wan)位(wei)(wei)數值），然后(hou)第三天(tian)(tian)加(jia)(jia)水G噸時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)密度(du)應為(wei)(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^5/(E+F+G)×10^6(Z為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水密度(du)十(shi)萬(wan)位(wei)(wei)數)，第四(si)天(tian)(tian)或第五(wu)天(tian)(tian)收獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)數目(mu)應為(wei)(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^5(W為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水密度(du)十(shi)萬(wan)位(wei)(wei)數,H為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)數目(mu))，因為(wei)(wei)(wei)總(zong)需求量的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數目(mu)應等于最(zui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)數目(mu)。
則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^5經(jing)過計(ji)算是A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一般情況(kuang)下E,F,G的值(zhi)接(jie)近)，則近似AB=30EW, 即(ji)若一天需要(yao)濃縮藻A升，則每天應接(jie)種E=AB÷30W噸(dun)水。（W和B的值(zhi)應經過三級培養和收集藻水后才知道近似數值(zhi)）。
2—2低水位(wei)高密度接種(zhong)（接種(zhong)密度為P×10^5cell/ml,P為接種(zhong)密度十萬位(wei)數值）（未(wei)特別說(shuo)明藻(zao)水藻(zao)細胞密度就是(shi)(shi)cell/ml）（以下的推(tui)理是(shi)(shi)建立在三級(ji)藻(zao)第(di)二次(ci)，第(di)三次(ci)加水和(he)收獲的密度為10^6級(ji)）。
若一天(tian)三級濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求(qiu)量(liang)為(wei)(wei)A升，則(ze)(ze)總(zong)(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)為(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)A升濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所(suo)含的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)(zhi)，B為(wei)(wei)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)千(qian)萬(wan)位(wei)的(de)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)(zhi)),一般(ban)情況下二(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)密(mi)度(du)為(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)二(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)百萬(wan)位(wei)的(de)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)(zhi)),若一天(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)，則(ze)(ze)一天(tian)需要二(er)(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積(ji)d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第(di)二(er)(er)天(tian)加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)F噸，此(ci)時(shi)加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)后(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)第(di)二(er)(er)天(tian)加(jia)(jia)F噸水(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)百萬(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)(zhi)），然后(hou)(hou)第(di)三天(tian)加(jia)(jia)水(shui)(shui)(shui)G噸時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)密(mi)度(du)應(ying)(ying)為(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^6/(E+F+G) ×10^6 (Z為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)百萬(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu))，第(di)四天(tian)或第(di)五天(tian)收獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)應(ying)(ying)為(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^6 (W為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)百萬(wan)位(wei)數(shu)(shu)(shu)(shu),H為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu))，因(yin)為(wei)(wei)總(zong)(zong)需求(qiu)量(liang)的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)應(ying)(ying)等于最(zui)后(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)(shu)目(mu)(mu)，則(ze)(ze)K=H,則(ze)(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^6經(jing)過計算是A×B=(E+F+G) ×10×W。(一般(ban)情況下E,F,G的(de)值(zhi)(zhi)(zhi)接近)，則(ze)(ze)近似(si)AB=300EW, 即若一天(tian)需要濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升，則(ze)(ze)每天(tian)應(ying)(ying)接種E=AB÷300W噸水(shui)(shui)(shui)。（W和(he)B的(de)值(zhi)(zhi)(zhi)應(ying)(ying)經(jing)過實地三級培養和(he)收集藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)后(hou)(hou)才知道(dao)近似(si)數(shu)(shu)(shu)(shu)值(zhi)(zhi)(zhi)）。
