對蝦(xia)(xia)種苗(miao)(miao)(miao)企業(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)生存主要是依靠蝦(xia)(xia)苗(miao)(miao)(miao)養殖效果(guo)來決(jue)定的(de)(de)(de)(de)(de)，蝦(xia)(xia)苗(miao)(miao)(miao)成活率的(de)(de)(de)(de)(de)高低直接影響著產業(ye)鏈的(de)(de)(de)(de)(de)上上下下。單胞藻對于(yu)(yu)蝦(xia)(xia)苗(miao)(miao)(miao)早期是最適合(he)(he)的(de)(de)(de)(de)(de)餌料，如(ru)果(guo)培(pei)育(yu)得當，不僅可(ke)以(yi)節約成本，減少育(yu)苗(miao)(miao)(miao)水(shui)體環(huan)境負荷，尤(you)其是對于(yu)(yu)蝦(xia)(xia)苗(miao)(miao)(miao)的(de)(de)(de)(de)(de)發育(yu)打下堅(jian)實(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)基礎，提(ti)高成活率。結合(he)(he)個人的(de)(de)(de)(de)(de)育(yu)苗(miao)(miao)(miao)感受，投喂(wei)單胞藻與不投喂(wei)的(de)(de)(de)(de)(de)區(qu)別還是有(you)的(de)(de)(de)(de)(de)，比如(ru)苗(miao)(miao)(miao)的(de)(de)(de)(de)(de)變(bian)態時間縮(suo)短，活力個頭大小，水(shui)質均優于(yu)(yu)未投喂(wei)單胞藻的(de)(de)(de)(de)(de)苗(miao)(miao)(miao)，當然如(ru)果(guo)培(pei)育(yu)不得當，反作用(yong)也有(you)，比如(ru)投喂(wei)有(you)害菌超(chao)標的(de)(de)(de)(de)(de)藻液(ye)，藻類老化(hua)，投喂(wei)過量(liang)等。所以(yi)合(he)(he)理運用(yong)，方可(ke)收(shou)到理想效果(guo)。限于(yu)(yu)個人水(shui)平，描(miao)述方法的(de)(de)(de)(de)(de)錯誤(wu)不足之處，懇請大家指正(zheng)。
一 、單胞藻純培養室操作描述
儀器使用
（1） 超凈工(gong)作臺
使(shi)用前提前開機(ji)，打開紫外線(xian)燈和風機(ji)開關20分鐘。超(chao)凈臺面(mian)上不(bu)存放(fang)不(bu)必(bi)要(yao)的物品，保(bao)持工作(zuo)(zuo)(zuo)區內的凈化氣(qi)流(liu)不(bu)受(shou)干擾(rao)，工作(zuo)(zuo)(zuo)時(shi)盡(jin)量避免作(zuo)(zuo)(zuo)明顯(xian)干擾(rao)氣(qi)流(liu)的動作(zuo)(zuo)(zuo)；超(chao)凈臺保(bao)持光滑(hua)水平，光滑(hua)便于用酒精(jing)消毒(du)(du)布(bu)擦(ca)，水平是(shi)倒培養(yang)基時(shi)使(shi)培養(yang)皿內平板厚度一致(zhi)。工作(zuo)(zuo)(zuo)時(shi)超(chao)凈臺周圍空(kong)氣(qi)流(liu)動要(yao)緩慢，雜菌(jun)(jun)盡(jin)量減(jian)(jian)少(shao)，所以(yi)要(yao)定期(qi)清潔(jie)消毒(du)(du)保(bao)種室(shi)內，關閉門窗，盡(jin)可能減(jian)(jian)少(shao)雜菌(jun)(jun)數量；空(kong)氣(qi)過(guo)濾網定期(qi)清潔(jie)。
（2）真(zhen)空泵和溶劑(ji)過(guo)濾器及(ji)過(guo)濾膜(mo)
此環節(jie)過濾只是(shi)為單胞藻純培養室（保種，提純，擴培試管(guan)級(ji)）準備清潔無菌海水。其他級(ji)別(bie)的培養無需(xu)此環節(jie)。
過濾(lv)(lv)(lv)膜使(shi)用(yong)0.2微米孔徑(jing)，不可用(yong)手拿(na)，用(yong)鑷子選取。真空(kong)泵(beng)與溶劑過濾(lv)(lv)(lv)器(qi)之間通過合適口(kou)徑(jing)的橡膠(jiao)管連接緊(jin)密(mi)，每次(ci)過濾(lv)(lv)(lv)要(yao)注意濾(lv)(lv)(lv)膜的過濾(lv)(lv)(lv)效果，防止濾(lv)(lv)(lv)孔阻塞影響過濾(lv)(lv)(lv)效果。濾(lv)(lv)(lv)瓶內的濾(lv)(lv)(lv)液不能沒過濾(lv)(lv)(lv)板(ban)出水口(kou)，否則(ze)濾(lv)(lv)(lv)液將(jiang)被抽吸入真空(kong)泵(beng)，導(dao)致(zhi)真空(kong)泵(beng)損壞。
應該使濾板內的營養(yang)液過(guo)濾盡后（無水滴）才能停泵。要定期注(zhu)意真空泵內油(you)量(liang)，注(zhu)意加油(you)。
(3) 恒溫鼓風干燥箱
設(she)(she)(she)定(ding)(ding)溫(wen)度時(shi)。先按控(kong)溫(wen)儀功(gong)能(neng)鍵(jian)(jian)(jian)SET進入溫(wen)度設(she)(she)(she)定(ding)(ding)狀態，此時(shi)SP設(she)(she)(she)定(ding)(ding)顯(xian)示(shi)一(yi)閃(shan)(shan)一(yi)閃(shan)(shan)，要按移動(dong)位鍵(jian)(jian)(jian)配(pei)合加鍵(jian)(jian)(jian)或減鍵(jian)(jian)(jian)，設(she)(she)(she)定(ding)(ding)時(shi)先從分位數字設(she)(she)(she)定(ding)(ding)，一(yi)直到百(bai)位數，設(she)(she)(she)定(ding)(ding)結束需按一(yi)下功(gong)能(neng)鍵(jian)(jian)(jian)SET,此時(shi)干燥箱進入升溫(wen)狀態，加熱指(zhi)示(shi)燈亮，當箱內(nei)溫(wen)度接近設(she)(she)(she)定(ding)(ding)溫(wen)度時(shi)，加熱指(zhi)示(shi)燈閃(shan)(shan)動(dong)多次，控(kong)制進入恒溫(wen)狀態。
使(shi)用注(zhu)意事項(xiang)：物品不能堆得太滿，更不能堵住出風口，以免影響溫度均勻上升。若是有牛皮紙和保鮮膜時，溫度不能超過180度。取出物品時，箱內外溫差不宜過高，防止玻璃器皿炸裂。橡膠制品不能放入。
（4）加濕器
配(pei)合生化培(pei)養(yang)箱使用(yong)。
水源是(shi)蒸餾水；不應容器(qi)內帶水移(yi)動(dong)加(jia)濕(shi)器(qi)；加(jia)水時應在容器(qi)上表示的滿(man)水線(xian)為止。
應注意(yi)的事項：平時留意(yi)觀察水(shui)箱的存水(shui)量(liang)，及時予以補充，遠離熱源(yuan)，腐蝕物。
（5）蒸(zheng)汽消毒(du)器
容(rong)器加(jia)水(shui)時，水(shui)位(wei)一定要超過電(dian)熱(re)(re)管，最(zui)好是(shi)到3個(ge)支撐點的(de)(de)下緣，如果連(lian)續使用(yong)，應在每次消毒前補足蒸(zheng)發水(shui)量，不然少水(shui)會(hui)燒壞(huai)電(dian)熱(re)(re)管。蓋上的(de)(de)放(fang)氣軟管插入消毒桶圓槽內，對(dui)正蓋和主體(ti)(ti)的(de)(de)螺栓槽，依次將相對(dui)方的(de)(de)翼型螺母予(yu)以(yi)旋緊(jin)，使蓋與主體(ti)(ti)密合(he)，加(jia)熱(re)(re)開(kai)始時，應將放(fang)氣閥與安全閥的(de)(de)小手(shou)柄扳(ban)至垂直放(fang)氣方位(wei)，必(bi)須待有較(jiao)急(ji)蒸(zheng)汽噴出，即將小手(shou)柄扳(ban)回水(shui)平“關閉”方位(wei)。
當到(dao)達所需壓(ya)力(li)和(he)溫度(du)，計算消毒時間，消毒畢后(hou)(hou)，關(guan)閉(bi)電源，待壓(ya)力(li)指針指向0時，將放氣(qi)(qi)閥的小手柄扳至垂直放氣(qi)(qi)方位，氣(qi)(qi)放完后(hou)(hou)，打開容器蓋。物(wu)品消毒后(hou)(hou)要迅速干燥。
應注意滅(mie)菌液體(ti)時(shi)，不(bu)(bu)超過(guo)盛(sheng)液體(ti)容器體(ti)積的(de)(de)3/4，瓶(ping)塞(sai)(sai)不(bu)(bu)可用軟木塞(sai)(sai)或未打孔(kong)的(de)(de)橡膠塞(sai)(sai)。滅(mie)菌器內冷(leng)空(kong)(kong)氣(qi)必(bi)須完全排除(chu)。因為空(kong)(kong)氣(qi)的(de)(de)膨脹壓(ya)(ya)(ya)(ya)(ya)大(da)于水(shui)蒸(zheng)氣(qi)的(de)(de)膨脹壓(ya)(ya)(ya)(ya)(ya)，當水(shui)蒸(zheng)氣(qi)含(han)冷(leng)空(kong)(kong)氣(qi)時(shi)，壓(ya)(ya)(ya)(ya)(ya)力表所表示的(de)(de)壓(ya)(ya)(ya)(ya)(ya)力是水(shui)蒸(zheng)氣(qi)壓(ya)(ya)(ya)(ya)(ya)力和部分冷(leng)空(kong)(kong)氣(qi)壓(ya)(ya)(ya)(ya)(ya)力之和，不(bu)(bu)是水(shui)蒸(zheng)氣(qi)的(de)(de)實(shi)際(ji)壓(ya)(ya)(ya)(ya)(ya)力，而同一(yi)壓(ya)(ya)(ya)(ya)(ya)力下的(de)(de)實(shi)際(ji)溫(wen)度，含(han)空(kong)(kong)氣(qi)的(de)(de)蒸(zheng)汽低(di)于飽和蒸(zheng)汽，這(zhe)樣導致達(da)不(bu)(bu)了(le)消(xiao)毒(du)效果。絕(jue)不(bu)(bu)可堵塞(sai)(sai)安(an)全閥出氣(qi)孔(kong)，必(bi)須留空(kong)(kong)位(wei)保證其暢通(tong)放氣(qi)，發現超溫(wen)超壓(ya)(ya)(ya)(ya)(ya)，立即斷電。
蒸餾器
先關(guan)閉(bi)放(fang)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)閥(fa)，打開進水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)閥(fa)，待(dai)溢(yi)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)皮(pi)管(guan)有水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)流(liu)出(chu)，方可(ke)接通電源，此(ci)時可(ke)暫(zan)時關(guan)閉(bi)進水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)閥(fa)，待(dai)出(chu)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)皮(pi)管(guan)有蒸(zheng)(zheng)餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)流(liu)出(chu)，打開進水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)閥(fa)，制備蒸(zheng)(zheng)餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)。定期清洗蒸(zheng)(zheng)餾(liu)(liu)器內壁，除去水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)垢(gou)，不(bu)然影(ying)響蒸(zheng)(zheng)餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)質量和使(shi)用效果。切(qie)不(bu)可(ke)關(guan)閉(bi)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)閥(fa)制備蒸(zheng)(zheng)餾(liu)(liu)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)，否則(ze)燒壞電熱管(guan)。
（6）鼓風機
定期更換(huan)吸氣口的過(guo)濾棉(mian)，異常情況，請電工檢查(cha)。
（7）空(kong)調(diao)
保(bao)種室若有(you)生長藻種，需維持恒定溫(wen)度，反之(zhi)關閉。一級，二級空調(diao)視外界氣溫(wen)調(diao)整(zheng)開關。
二 、衛生消毒
工具衛生消毒
1、濾水筒(tong)式(shi)(shi)過濾器(qi)。筒(tong)式(shi)(shi)過濾器(qi)的(de)濾芯應用(yong)一次更換一次，用(yong)過的(de)濾芯浸泡在1%鹽酸溶液中消毒(du)12h以(yi)上。然后(hou)用(yong)洗(xi)潔(jie)精清(qing)(qing)洗(xi)，再(zai)用(yong)足量清(qing)(qing)水沖洗(xi)干(gan)凈，晾干(gan)備用(yong)。（濾芯規格應小于等于0.5微米）。
2、試(shi)管(guan)（規格(ge)10毫(hao)升到20毫(hao)升），錐形瓶（50毫(hao)升到200毫(hao)升），500ml錐形瓶，2.5L瓶廣口瓶，移液管(guan)，移液槍管(guan)/盒，玻璃氣(qi)(qi)管(guan)，膠氣(qi)(qi)管(guan)，氣(qi)(qi)石(shi)(shi)，溶劑過濾(lv)器，培養皿。用(yong)(yong)(yong)過后應當用(yong)(yong)(yong)清(qing)(qing)水(shui)清(qing)(qing)洗后浸(jin)泡于1% 鹽(yan)酸12h以上（溶劑過濾(lv)器除外(wai)，浸(jin)泡時(shi)相(xiang)近(jin)大(da)小(xiao)器皿分類放不同的消毒桶，規格(ge)相(xiang)差大(da)，易(yi)導致相(xiang)互碰(peng)撞碎爛）然后用(yong)(yong)(yong)洗潔精清(qing)(qing)洗(用(yong)(yong)(yong)毛刷清(qing)(qing)洗試(shi)管(guan)底部(bu)(bu)時(shi)，不可太(tai)用(yong)(yong)(yong)力，否(fou)則底部(bu)(bu)易(yi)破裂(lie))，再用(yong)(yong)(yong)大(da)量清(qing)(qing)水(shui)沖洗干(gan)(gan)凈，風(feng)干(gan)(gan)或(huo)曬干(gan)(gan)，高壓滅菌后，放入(ru)恒(heng)溫干(gan)(gan)燥(zao)(zao)箱（膠氣(qi)(qi)管(guan)，氣(qi)(qi)石(shi)(shi)除外(wai)）干(gan)(gan)燥(zao)(zao)備用(yong)(yong)(yong)。
3、聚乙烯藻(zao)袋用(yong)(yong)(yong)于二(er)級(ji)藻(zao)類(lei)藻(zao)種掛袋培養或3級(ji)擴(kuo)培（一般使用(yong)(yong)(yong)盛裝(zhuang)藻(zao)液(ye)12升(sheng)左右）。先用(yong)(yong)(yong)清水沖(chong)洗(xi)干凈內外，浸泡于1% 鹽酸(suan)12h以(yi)上，再(zai)用(yong)(yong)(yong)大量(liang)清水沖(chong)洗(xi)干凈，風干或曬干，備(bei)用(yong)(yong)(yong)。由(you)于藻(zao)袋近似密封(feng)性(xing)，對(dui)于防止微(wei)生物(wu)污染(ran)有很好的效果。
4、毛巾、保種室，一(yi)級和(he)二級毛巾不可混用，所用毛巾后(hou)都(dou)應(ying)消毒清洗(xi)晾干(gan)后(hou)備用。
5、錫(xi)箔紙(zhi)：除非粘(zhan)上(shang)油污(wu)或(huo)污(wu)物以及破損(sun)，都(dou)應重復使用(yong)。
6、牛(niu)皮紙：定期拿(na)到(dao)烘箱(xiang)烘干。
7、定(ding)期更(geng)換空氣(qi)(qi)過濾器（用于1，2級(ji)培養的進氣(qi)(qi)過濾）的濾芯，濾芯已油化(hua)或沖(chong)散的棄去。
8、定(ding)期更換鼓風(feng)機進風(feng)口的過濾棉。
9、對新購入(ru)的器皿應(ying)先除去包裝沾(zhan)染(ran)的污垢后，用(yong)(yong)洗(xi)潔精刷洗(xi)，流(liu)水沖(chong)凈，再(zai)浸泡于1%的鹽酸12h，使游離的堿性(xing)物(wu)質(zhi)除去，再(zai)用(yong)(yong)清水沖(chong)洗(xi)干凈，風干或曬干備用(yong)(yong)。
室內衛生消毒
1、保種室每(mei)天早上用清水擦洗實驗臺(tai)面(mian)，地板，墻壁，木架后，開紫(zi)外燈(deng)消毒20分鐘，此(ci)時關(guan)掉(diao)空(kong)調，關(guan)掉(diao)日光燈(deng)，由于(yu)紫(zi)外燈(deng)照射會產生一(yi)定(ding)量的臭氧，對(dui)人體(ti)有害，所(suo)以消毒關(guan)閉紫(zi)外燈(deng)后人應隔一(yi)段時間(jian)再進去。進保種室換(huan)鞋。
2、一級和二級室每(mei)天清潔，接(jie)種前接(jie)種后承載(zai)物框架都應(ying)用(yong)消毒(du)液(ye)消毒(du)。
3、門(men)口消毒池定期更(geng)換消毒藥水（高錳酸鉀）。
4、常用消(xiao)毒劑濃度 1%鹽酸，次氯酸鈉20ppm（有效氯），碘液（1000ppm）,酒精70-75%,高錳酸鉀(jia)1mg/L。
三 、接種
藻種固體培養基制備
所需燒杯(bei)，玻(bo)棒須(xu)(xu)(xu)清(qing)洗干凈，錐(zhui)形瓶(ping)和培(pei)養(yang)(yang)皿須(xu)(xu)(xu)消毒清(qing)洗滅(mie)菌(jun)烘干。將(jiang)稱好的(de)純(chun)化瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂粉加入(ru)燒杯(bei)再加入(ru)一定量的(de)海水(shui)(shui)，加熱(re)（必須(xu)(xu)(xu)不停攪拌(ban)，以(yi)免瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂糊底燒焦(jiao)）至完全融化，加熱(re)后(hou)的(de)瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂培(pei)養(yang)(yang)基應當(dang)透明無顯(xian)著沉(chen)淀，若(ruo)明顯(xian)，可采用(yong)清(qing)潔的(de)白色薄(bo)絨布或中間夾有薄(bo)層(ceng)吸水(shui)(shui)棉(mian)的(de)雙層(ceng)紗布鋪在漏斗上(shang)趁熱(re)過濾，融化畢后(hou)精確(que)加入(ru)營養(yang)(yang)鹽（維生素B溶液須(xu)(xu)(xu)等培(pei)養(yang)(yang)基高壓(ya)滅(mie)菌(jun)后(hou)冷卻(que)至50攝氏度(du)以(yi)下再加）。
培(pei)(pei)養基采(cai)用121攝(she)氏度(du)高(gao)壓蒸汽滅菌20至(zhi)30分鐘即可，培(pei)(pei)養基滅菌后(hou)應立即取出，冷(leng)卻至(zhi)50攝(she)氏度(du)以(yi)下(xia)，即加維(wei)生素B溶(rong)液。將盛裝培(pei)(pei)養基的錐(zhui)形(xing)瓶(ping)和培(pei)(pei)養皿放(fang)(fang)在超凈工作臺上(shang)，點燃酒(jiu)精燈，右手托起錐(zhui)形(xing)瓶(ping)底(di)(di)，將瓶(ping)口在酒(jiu)精燈稍加燒(shao)，然后(hou)迅速(su)將培(pei)(pei)養基倒入培(pei)(pei)養皿中，以(yi)鋪滿(man)皿底(di)(di)為止（厚(hou)薄適中）。鋪放(fang)(fang)好后(hou)，放(fang)(fang)置20-30分鐘，待(dai)培(pei)(pei)養基凝固后(hou)，即開始操(cao)作。
若是(shi)做斜面培(pei)養基(ji)(ji)，則加入維(wei)生素B溶(rong)液后(hou)(hou)，將盛裝(zhuang)培(pei)養基(ji)(ji)的(de)錐形(xing)瓶和試(shi)管以及一根厚約1厘米的(de)小木板放(fang)在超凈工(gong)作臺上。分裝(zhuang)約為試(shi)管高度的(de)1/3-2/3（視情況操(cao)作），分裝(zhuang)量應以能(neng)形(xing)成(cheng)2/3底層和1/3斜面量為好(hao)，擺置成(cheng)適當斜面，待(dai)其(qi)自然(ran)凝固。培(pei)養基(ji)(ji)制備好(hao)后(hou)(hou)，如(ru)發現破裂，水分浸入，色澤(ze)異常(chang)等均應棄去.
待凝固后(hou)即進行(xing)操作(zuo)，現一般采(cai)用平(ping)板劃(hua)線(xian)接(jie)種(zhong)和涂布接(jie)種(zhong)。
平板劃線接種
接(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)在(zai)酒(jiu)精燈火焰(yan)(yan)上充分(fen)燒(shao)紅后，接(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)柄(bing)一(yi)(yi)邊(bian)轉動(dong)一(yi)(yi)邊(bian)慢慢來回(hui)通過(guo)火焰(yan)(yan)3次，待冷卻至(zhi)室溫(wen)方(fang)可(ke)挑取(qu)藻(zao)種(zhong)(zhong)（為保(bao)證藻(zao)種(zhong)(zhong)不(bu)(bu)(bu)被燙死，挑種(zhong)(zhong)前可(ke)將接(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)接(jie)(jie)(jie)觸(chu)培(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)內(nei)壁或培(pei)養(yang)(yang)基(ji)），迅速接(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)至(zhi)新培(pei)養(yang)(yang)基(ji)（劃(hua)線(xian)可(ke)采用(yong)斜(xie)線(xian)法(fa)(fa)，方(fang)格(ge)法(fa)(fa)，曲線(xian)法(fa)(fa)，放射(she)法(fa)(fa)等）。左手(shou)握住平(ping)(ping)板(ban)，用(yong)大(da)拇(mu)指和食指稍(shao)稍(shao)抬起(qi)皿(min)(min)蓋(gai)，同(tong)時靠近火焰(yan)(yan)周圍(wei)，右手(shou)持接(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)伸(shen)入皿(min)(min)內(nei)，在(zai)平(ping)(ping)板(ban)上一(yi)(yi)個區域作劃(hua)線(xian)（依方(fang)法(fa)(fa)不(bu)(bu)(bu)同(tong)，動(dong)作不(bu)(bu)(bu)同(tong)）。劃(hua)線(xian)時使接(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)與平(ping)(ping)板(ban)表(biao)面成30-40度角輕(qing)輕(qing)接(jie)(jie)(jie)觸(chu)，以腕力在(zai)表(biao)面作較快(kuai)的(de)滑動(dong)（注意不(bu)(bu)(bu)要劃(hua)破平(ping)(ping)板(ban)表(biao)面或伸(shen)進(jin)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)內(nei)）。接(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)挑種(zhong)(zhong)后和劃(hua)線(xian)完抽出時均不(bu)(bu)(bu)可(ke)碰及皿(min)(min)壁/口(kou)，更不(bu)(bu)(bu)能碰其它物體(ti)和臺面。接(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)完后，將接(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)從(cong)柄(bing)部至(zhi)環(huan)端(duan)(duan)逐漸通過(guo)酒(jiu)精燈火焰(yan)(yan)滅菌(jun)，不(bu)(bu)(bu)能直接(jie)(jie)(jie)燒(shao)環(huan)，以免殘留在(zai)接(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)環(huan)上的(de)藻(zao)體(ti)或菌(jun)體(ti)爆(bao)濺污(wu)染(ran)空間。上述(shu)操作完成后，即用(yong)無菌(jun)封(feng)口(kou)膜(mo)封(feng)培(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)口(kou)（膜(mo)使用(yong)前須用(yong)酒(jiu)精消毒，紫外燈消毒，風干），封(feng)口(kou)時，用(yong)左手(shou)大(da)拇(mu)指摁住膜(mo)一(yi)(yi)邊(bian)末端(duan)(duan)，右手(shou)大(da)拇(mu)指和食指捏住另一(yi)(yi)邊(bian)末端(duan)(duan)，迅速繞(rao)培(pei)養(yang)(yang)皿(min)(min)口(kou)繞(rao)一(yi)(yi)圈，封(feng)口(kou)。
涂布接種
所(suo)用種液必須經(jing)過弧菌檢測(ce)合格(ge)后方可(ke)使用。涂(tu)布棒(bang)在火(huo)(huo)焰上慢慢來回過火(huo)(huo)焰3次，冷卻（不(bu)可(ke)驟冷），將(jiang)種液用移液槍(qiang)從試管(guan)吸出注入(ru)平板上面(mian)（槍(qiang)管(guan)不(bu)可(ke)碰及試管(guan)外壁，更(geng)不(bu)能碰及其(qi)它(ta)物品或臺面(mian)），迅(xun)速(su)用涂(tu)布棒(bang)在表面(mian)作(zuo)來回左右的涂(tu)布，讓藻液分布均勻，畢后，封(feng)口(kou)同平板劃(hua)線。
試管液體培養基接種
所用種液必須經過弧菌(jun)(jun)(jun)檢(jian)測合格(ge)后方可使用。火(huo)焰滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)前試(shi)管(guan)(guan)(guan)口(kou)外(wai)壁不(bu)能有(you)水滴（易導致受熱不(bu)均(jun)而破(po)裂(lie)）,燒試(shi)管(guan)(guan)(guan)口(kou)時(shi)(shi)，試(shi)管(guan)(guan)(guan)傾斜(xie)45度角(jiao)，不(bu)斷移(yi)動試(shi)管(guan)(guan)(guan)，使試(shi)管(guan)(guan)(guan)口(kou)受熱均(jun)勻，滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)時(shi)(shi)間3秒左右。滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)后不(bu)能驟冷，防止(zhi)試(shi)管(guan)(guan)(guan)破(po)裂(lie)。畢后，用盛裝營養液150或200ml的錐形瓶(ping)（也(ye)要滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)瓶(ping)口(kou)）向試(shi)管(guan)(guan)(guan)中傾倒(dao)營養液，每(mei)次(ci)只能拿一(yi)個試(shi)管(guan)(guan)(guan)（注(zhu)：若幾個試(shi)管(guan)(guan)(guan)對比時(shi)(shi)，可以同時(shi)(shi)拿在(zai)手里，用大拇指和(he)手掌），倒(dao)好后，同樣試(shi)管(guan)(guan)(guan)和(he)錐形瓶(ping)口(kou)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)，試(shi)管(guan)(guan)(guan)塞也(ye)要滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)，塞試(shi)管(guan)(guan)(guan)塞時(shi)(shi)不(bu)要移(yi)動試(shi)管(guan)(guan)(guan)迎接塞，以免試(shi)管(guan)(guan)(guan)在(zai)移(yi)動中納入可能含(han)菌(jun)(jun)(jun)空氣，火(huo)焰旁為無菌(jun)(jun)(jun)。
所(suo)有試管(guan)(guan)分(fen)裝好后，即(ji)接(jie)種(zhong)。用移(yi)液槍(qiang)選(xuan)(xuan)取(qu)(qu)移(yi)液量（試管(guan)(guan)口滅(mie)菌），注入新(xin)培養(yang)(yang)基(ji)，槍(qiang)管(guan)(guan)不(bu)可碰及(ji)管(guan)(guan)外壁，更(geng)不(bu)能碰及(ji)其它物品或臺面，一(yi)(yi)(yi)支槍(qiang)管(guan)(guan)只能和(he)同一(yi)(yi)(yi)種(zhong)液使用，選(xuan)(xuan)取(qu)(qu)另一(yi)(yi)(yi)試管(guan)(guan)種(zhong)液時必須更(geng)換(huan)槍(qiang)頭。接(jie)種(zhong)畢(bi)后，選(xuan)(xuan)取(qu)(qu)合適(shi)光照(zhao)溫度培養(yang)(yang)。由于試管(guan)(guan)培養(yang)(yang)是靜置培養(yang)(yang)，而在靜置條件下，藻細胞(bao)會聚(ju)集在試管(guan)(guan)底部，且(qie)藻細胞(bao)周圍會形成透過養(yang)(yang)分(fen)的(de)(de)屏障，營(ying)養(yang)(yang)鹽(yan)的(de)(de)攝入受(shou)阻，光照(zhao)吸收不(bu)均，為使營(ying)養(yang)(yang)鹽(yan)攝入正(zheng)常，藻細胞(bao)受(shou)光均勻，需要(yao)定時搖置試管(guan)(guan)（手先噴消毒酒精，手腕使勁搖，不(bu)要(yao)擺臂(bei)，不(bu)能倒置搖）
三角瓶，500ml瓶，2.5L瓶液體培養基接種
三角(jiao)瓶(ping)接(jie)種(zhong)需(xu)無菌操(cao)作。500ml瓶(ping)，2.5L瓶(ping)液體培(pei)養(yang)(yang)基接(jie)種(zhong)均(jun)(jun)在室內衛生條(tiao)件下操(cao)作。3種(zhong)瓶(ping)和所需(xu)營(ying)養(yang)(yang)液及(ji)錫(xi)紙，移液管(guan)，洗(xi)耳(er)球，氣管(guan)，氣石均(jun)(jun)需(xu)經消毒清洗(xi)，滅(mie)菌后使用(yong)。三角(jiao)瓶(ping)需(xu)定時搖置，500ml，2.5L瓶(ping)培(pei)養(yang)(yang)在通氣條(tiao)件下培(pei)養(yang)(yang)。
二級聚乙烯藻袋液體培養基接種
氣管，氣石(shi)均(jun)需經(jing)消毒清洗(xi)，滅菌(jun)后(hou)使(shi)用(yong)，抽(chou)藻(zao)管前(qian)次用(yong)畢后(hou)應(ying)(ying)當(dang)用(yong)水(shui)(shui)泵將(jiang)管內灌(guan)滿消毒鹽酸溶液(ye)，今次用(yong)前(qian)需用(yong)海水(shui)(shui)或淡水(shui)(shui)沖洗(xi)干凈(jing)后(hou)使(shi)用(yong)。選取的(de)(de)種液(ye)應(ying)(ying)當(dang)是無明顯沉(chen)淀，泡(pao)沫(mo)，原生動(dong)物(wu)，附著物(wu)，色澤正(zheng)常，藻(zao)細(xi)胞密度大，形態正(zheng)常，弧菌(jun)檢測合格后(hou)選用(yong)。所用(yong)海水(shui)(shui)漂(piao)(piao)白(bai)水(shui)(shui)消毒有效氯應(ying)(ying)足10ppm，曝氣12小(xiao)時(shi)，檢測余氯，加硫(liu)代硫(liu)酸鈉中和，方可使(shi)用(yong)。若使(shi)用(yong)稀釋(shi)的(de)(de)漂(piao)(piao)白(bai)水(shui)(shui)，應(ying)(ying)當(dang)天配(pei)制當(dang)天使(shi)用(yong)，而未使(shi)用(yong)的(de)(de)要在(zai)24小(xiao)時(shi)后(hou)棄去。且稀釋(shi)的(de)(de)漂(piao)(piao)白(bai)水(shui)(shui)必須加蓋放(fang)在(zai)避光的(de)(de)容器內保存。由于漂(piao)(piao)白(bai)水(shui)(shui)會隨(sui)時(shi)間漸漸分(fen)解，一次性購(gou)入的(de)(de)漂(piao)(piao)白(bai)水(shui)(shui)不應(ying)(ying)太多，不要過量(liang)儲(chu)存，以免(mian)影響(xiang)滅菌(jun)功(gong)效。
1,2，3級接藻示意
試(shi)管(guan)→三角瓶(ping)→500ml瓶(ping)子→2500ml瓶(ping)子→20升(sheng)的藻(zao)種聚乙烯袋(dai) →18升(sheng)的擴培(pei)藻(zao)聚乙烯袋(dai)或者(zhe)培(pei)藻(zao)池
相關說明
1、母液(ye)(ye)的(de)配置(zhi)可以參考教(jiao)科(ke)書上所寫，然(ran)后(hou)結合當地的(de)水質(zhi)適(shi)當修改即可。氮，磷(lin)，鐵元素，維生素B1,B12是必須使用,維生素母液(ye)(ye)保存于低溫弱光環(huan)境(jing)下(xia)，其中維生素的(de)添加(jia)需要先高壓滅菌(jun)后(hou)再加(jia)入(ru)母液(ye)(ye)中。其余營養(yang)鹽(yan)先配置(zhi)好后(hou)，再滅菌(jun)。如(ru)果(guo)是硅藻類，還應加(jia)上硅酸(suan)鈉。
2、保種室所需營養液(ye)（母液(ye)千(qian)分之0.8的比例添加）除需高壓滅(mie)菌外(wai)還必(bi)須經過真(zhen)空泵(beng)抽濾后才(cai)能用，微孔(kong)濾膜(mo)直徑(jing)為50毫米，孔(kong)徑(jing)為0.2微米。
3、接種比例A:試(shi)管0.07—0.09（隨密度大小變化(hua)），10毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)試(shi)管加營(ying)養(yang)(yang)(yang)液7毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)，藻(zao)種0.5毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)，20毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)試(shi)管中(zhong)營(ying)養(yang)(yang)(yang)液加12.5毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)營(ying)養(yang)(yang)(yang)液，1毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)藻(zao)種。B:三(san)(san)角(jiao)瓶(ping)(ping)0.09-0.11。在100毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)，150毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)，200毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)，250毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)三(san)(san)角(jiao)瓶(ping)(ping)中(zhong)分(fen)別(bie)加營(ying)養(yang)(yang)(yang)液，70，80，120，150毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)（可(ke)按一(yi)試(shi)管對應(ying)一(yi)個三(san)(san)角(jiao)瓶(ping)(ping)加入(ru)），C: 500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)（400毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)營(ying)養(yang)(yang)(yang)液）(按1個三(san)(san)角(jiao)瓶(ping)(ping)對應(ying)1個500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)加入(ru))D:2.5升(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)（2升(sheng)(sheng)營(ying)養(yang)(yang)(yang)液）（按1個500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)對應(ying)1個2.5升(sheng)(sheng)瓶(ping)(ping)加入(ru)），注意：上述(shu)若發現藻(zao)生長情況不(bu)好，需要先鏡檢(jian)，判斷后再決定是否接種。
一(yi)般情況下(xia)3袋二(er)級(ji)藻種應先擴培接種于容量(liang)400升(sheng)的桶（海水(shui)貯備(bei)及營養液提前配置好），然(ran)后(hou)立即進行二(er)級(ji)藻袋擴種，每個聚乙烯(xi)袋加(jia)18升(sheng)左右(you)藻水(shui)。
4、保(bao)種培養(yang)基(ji)制備：按1.5%的比(bi)例加瓊脂粉(fen)，煮沸后加營養(yang)鹽（母液(ye)千(qian)分(fen)之1添加），高(gao)壓(ya)(ya)滅菌。維生素(su)需(xu)高(gao)壓(ya)(ya)滅菌后培養(yang)基(ji)冷(leng)卻至(zhi)30攝氏度方可加入。（可用劃線法(fa)，涂布法(fa)等分(fen)離培養(yang)藻(zao)種）。
5、儀(yi)器(qi)的(de)清洗(xi)維(wei)護。溶劑(ji)過濾器(qi)使(shi)用(yong)(yong)后只用(yong)(yong)洗(xi)潔精(jing)和清水清洗(xi)。高(gao)壓滅(mie)菌后備(bei)用(yong)(yong)。其(qi)它玻璃(li)儀(yi)器(qi)，氣(qi)管，氣(qi)石(shi)，移液槍筒使(shi)用(yong)(yong)后需要浸泡在(zai)百分之一到百分之十(shi)的(de)稀鹽酸溶液中至(zhi)少半(ban)天，才能(neng)拿出清洗(xi)，風干(gan)，高(gao)壓滅(mie)菌后備(bei)用(yong)(yong)。
說(shuo)明：10的(de)2次方標示(shi)成10^2，以(yi)下數字的(de)次方通用此表示(shi)法
三級藻生產
三(san)級藻系統包括用水處(chu)理以及(ji)配(pei)送(song)，溫(wen)度與光照控制，藻種的供應(ying)等。為確保擴大培(pei)(pei)養(yang)成功，從接種到收(shou)獲的培(pei)(pei)養(yang)時間應(ying)該盡量(liang)縮短，以避(bi)免因為開(kai)放式培(pei)(pei)養(yang)隨(sui)培(pei)(pei)養(yang)規模擴大接觸外界感染源時間加長，三(san)級藻池滋生過多的有害生物(wu)，使三(san)級培(pei)(pei)養(yang)失敗。
1—1高水(shui)(shui)位(wei)(wei)低(di)密(mi)度(du)接種(zhong)(zhong)（接種(zhong)(zhong)密(mi)度(du)為P×10^4cell/ml,P為接種(zhong)(zhong)密(mi)度(du)萬位(wei)(wei)數值）（未(wei)特別說明藻水(shui)(shui)藻細(xi)胞密(mi)度(du)就是(shi)cell/ml）（以下的推理是(shi)建立(li)在(zai)三級(ji)藻第二次加水(shui)(shui)和收獲的密(mi)度(du)為105級(ji)）
若一(yi)天(tian)(tian)(tian)三(san)級濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)需(xu)求量為(wei)(wei)(wei)A升，則(ze)總(zong)(zong)藻(zao)(zao)細(xi)(xi)胞數(shu)(shu)(shu)目為(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell(K為(wei)(wei)(wei)A升濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)所含的藻(zao)(zao)細(xi)(xi)胞數(shu)(shu)(shu)值，B為(wei)(wei)(wei)濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)密(mi)度千萬(wan)(wan)位(wei)(wei)的數(shu)(shu)(shu)值),一(yi)般情況下二級藻(zao)(zao)種的密(mi)度為(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)二級藻(zao)(zao)密(mi)度百(bai)萬(wan)(wan)位(wei)(wei)的數(shu)(shu)(shu)值),若第一(yi)天(tian)(tian)(tian)接(jie)種E噸藻(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)，則(ze)一(yi)天(tian)(tian)(tian)需(xu)要二級藻(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×104/C×10^6=EP×10/C升，第三(san)天(tian)(tian)(tian)加水(shui)(shui)(shui)F噸，此時加水(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)第三(san)天(tian)(tian)(tian)加F噸水(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度十萬(wan)(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu)(shu)值），然后第五天(tian)(tian)(tian)收(shou)獲時，藻(zao)(zao)池藻(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)細(xi)(xi)胞總(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)目應為(wei)(wei)(wei)H=（E+F）×10^5×Z×10^6(Z為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)池藻(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)密(mi)度十萬(wan)(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu)(shu),H為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)池藻(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)細(xi)(xi)胞總(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)目)，因為(wei)(wei)(wei)總(zong)(zong)需(xu)求量的藻(zao)(zao)細(xi)(xi)胞數(shu)(shu)(shu)目應等于最后藻(zao)(zao)池藻(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)細(xi)(xi)胞總(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)目，則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F）×10^6×Z×10^5經(jing)過計(ji)算(suan)是(shi)A×B=(E+F)×10×Z。
舉例
若一(yi)天需濃縮藻(zao)(zao)(zao)320升(sheng)，則A=320，(一(yi)般情(qing)況下E和(he)(he)F的值(zhi)(zhi)接(jie)近)，則因為(wei)K=H,所以320×B=20EZ,即320B=20EZ，E=16B/Z,即B/Z噸藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)可以收集(ji)濃縮藻(zao)(zao)(zao)20升(sheng)(B為(wei)濃縮藻(zao)(zao)(zao)密度千萬(wan)位(wei)的數值(zhi)(zhi),Z為(wei)藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密度十萬(wan)位(wei)數)，即若一(yi)天需要濃縮藻(zao)(zao)(zao)A升(sheng)，則每天應(ying)接(jie)種E=AB÷20Z噸水(shui)(shui)。（Z和(he)(he)B的值(zhi)(zhi)應(ying)經過三級培養(yang)和(he)(he)收集(ji)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)后才知道近似數值(zhi)(zhi)）。
1—2高水位(wei)低密度(du)(du)接(jie)種（接(jie)種密度(du)(du)為(wei)P×10^4cell/ml,P為(wei)接(jie)種密度(du)(du)萬位(wei)數值）（未特別說明的藻(zao)水藻(zao)細胞密度(du)(du)就是cell/ml）（以(yi)下的推理是建立在三級(ji)藻(zao)第(di)二(er)次加水和收獲密度(du)(du)為(wei)10^6級(ji)）。
若一(yi)(yi)天(tian)(tian)三級濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求量為(wei)A升(sheng)(sheng)，則(ze)(ze)總藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)數(shu)(shu)目(mu)(mu)為(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)A升(sheng)(sheng)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)數(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度千萬位的(de)(de)(de)數(shu)(shu)值(zhi)),一(yi)(yi)般情(qing)況(kuang)(kuang)下二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)的(de)(de)(de)密(mi)(mi)度為(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度百萬位的(de)(de)(de)數(shu)(shu)值(zhi)),若一(yi)(yi)天(tian)(tian)接種(zhong)E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)，則(ze)(ze)一(yi)(yi)天(tian)(tian)需(xu)要(yao)二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)體(ti)積d=E×10^6×P×10^4/C×10^6=EP×10/C升(sheng)(sheng)，第三天(tian)(tian)加(jia)(jia)水(shui)F噸，此(ci)時(shi)加(jia)(jia)水(shui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6 cell/ml（Y為(wei)第三天(tian)(tian)加(jia)(jia)F噸水(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度百萬位數(shu)(shu)值(zhi)），然后(hou)第五天(tian)(tian)收(shou)獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)總數(shu)(shu)目(mu)(mu)應為(wei)H=（E+F）×10^6×Z×10^6 (Z為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度百萬位數(shu)(shu),H為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)總數(shu)(shu)目(mu)(mu))，因為(wei)總需(xu)求量的(de)(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)數(shu)(shu)目(mu)(mu)應等于最后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細胞(bao)總數(shu)(shu)目(mu)(mu)，則(ze)(ze)K=H,則(ze)(ze) A×10^3×B×10^7 =（E+F）×10^6×Z×10^6經過(guo)計算是A×B=(E+F) ×100×Z, (一(yi)(yi)般情(qing)況(kuang)(kuang)下E和(he)F的(de)(de)(de)值(zhi)接近)，則(ze)(ze)近似AB=200EZ, 即若一(yi)(yi)天(tian)(tian)需(xu)要(yao)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升(sheng)(sheng)，則(ze)(ze)每(mei)天(tian)(tian)應接種(zhong)E=AB÷200Z噸水(shui)。（Z和(he)B的(de)(de)(de)值(zhi)應經過(guo)三級培養和(he)收(shou)集藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)后(hou)才(cai)知道近似數(shu)(shu)值(zhi)）。
2—1低水(shui)位高密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)接種（接種密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)為P×10^5cell/ml,P為接種密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)十萬位數(shu)值）（未特別說明藻水(shui)藻細胞密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)就是(shi)cell/ml）（以(yi)下的(de)推理是(shi)建立在(zai)三級藻第二(er)次(ci)，第三次(ci)加水(shui)和收獲的(de)密(mi)(mi)(mi)度(du)(du)為105級）。
若(ruo)一(yi)天(tian)(tian)三(san)級濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求(qiu)量為(wei)A升(sheng)，則總(zong)(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數目為(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)A升(sheng)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數值(zhi)(zhi)，B為(wei)濃(nong)縮藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度千(qian)萬(wan)(wan)位的(de)數值(zhi)(zhi)),一(yi)般(ban)情況下二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)的(de)密(mi)(mi)度為(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度百(bai)萬(wan)(wan)位的(de)數值(zhi)(zhi)),若(ruo)第一(yi)天(tian)(tian)接種(zhong)E噸(dun)(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)，則一(yi)天(tian)(tian)需要(yao)二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)體(ti)積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升(sheng)，第二天(tian)(tian)加(jia)(jia)水(shui)F噸(dun)(dun)，此時(shi)加(jia)(jia)水(shui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)第二天(tian)(tian)加(jia)(jia)F噸(dun)(dun)水(shui)之(zhi)前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度十萬(wan)(wan)位數值(zhi)(zhi)），然(ran)后(hou)第三(san)天(tian)(tian)加(jia)(jia)水(shui)G噸(dun)(dun)時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)密(mi)(mi)度應為(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^5/(E+F+G)×10^6(Z為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度十萬(wan)(wan)位數)，第四(si)天(tian)(tian)或第五天(tian)(tian)收(shou)獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)(zong)數目應為(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^5(W為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度十萬(wan)(wan)位數,H為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)(zong)數目)，因為(wei)總(zong)(zong)需求(qiu)量的(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數目應等于最(zui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)(zong)數目。
則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^5經(jing)過計(ji)算是A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一(yi)般(ban)情況(kuang)下E,F,G的值接近)，則(ze)近似AB=30EW, 即(ji)若(ruo)一(yi)天需要(yao)濃縮藻(zao)A升，則(ze)每天應接種E=AB÷30W噸水(shui)。（W和B的值應經過三級(ji)培養和收集藻(zao)水(shui)后才知道近似數值）。
2—2低水(shui)位高密(mi)度(du)(du)接(jie)種（接(jie)種密(mi)度(du)(du)為(wei)P×10^5cell/ml,P為(wei)接(jie)種密(mi)度(du)(du)十萬位數值）（未特別說明藻水(shui)藻細胞密(mi)度(du)(du)就是cell/ml）（以下的推理是建立在(zai)三(san)級(ji)藻第(di)二次(ci)，第(di)三(san)次(ci)加水(shui)和收獲(huo)的密(mi)度(du)(du)為(wei)10^6級(ji)）。
若(ruo)一(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)三(san)級濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求(qiu)量(liang)(liang)為(wei)(wei)A升(sheng)，則(ze)(ze)總(zong)(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)目為(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)A升(sheng)濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)(du)千萬(wan)(wan)位的(de)(de)數(shu)值(zhi)),一(yi)(yi)般(ban)情(qing)況下(xia)二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的(de)(de)密(mi)度(du)(du)為(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)(du)百萬(wan)(wan)位的(de)(de)數(shu)值(zhi)),若(ruo)一(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)接種E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)，則(ze)(ze)一(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)需要(yao)二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升(sheng)，第(di)(di)二(er)天(tian)(tian)(tian)加水(shui)(shui)(shui)(shui)F噸，此時加水(shui)(shui)(shui)(shui)后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)第(di)(di)二(er)天(tian)(tian)(tian)加F噸水(shui)(shui)(shui)(shui)之前(qian)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)(du)百萬(wan)(wan)位數(shu)值(zhi)），然后第(di)(di)三(san)天(tian)(tian)(tian)加水(shui)(shui)(shui)(shui)G噸時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)密(mi)度(du)(du)應為(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^6/(E+F+G) ×10^6 (Z為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)(du)百萬(wan)(wan)位數(shu))，第(di)(di)四天(tian)(tian)(tian)或第(di)(di)五(wu)天(tian)(tian)(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)總(zong)(zong)數(shu)目應為(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^6 (W為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度(du)(du)百萬(wan)(wan)位數(shu),H為(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)總(zong)(zong)數(shu)目)，因為(wei)(wei)總(zong)(zong)需求(qiu)量(liang)(liang)的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)目應等于最后藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)總(zong)(zong)數(shu)目，則(ze)(ze)K=H,則(ze)(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^6經過(guo)計算是A×B=(E+F+G) ×10×W。(一(yi)(yi)般(ban)情(qing)況下(xia)E,F,G的(de)(de)值(zhi)接近(jin)(jin))，則(ze)(ze)近(jin)(jin)似AB=300EW, 即若(ruo)一(yi)(yi)天(tian)(tian)(tian)需要(yao)濃(nong)(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升(sheng)，則(ze)(ze)每天(tian)(tian)(tian)應接種E=AB÷300W噸水(shui)(shui)(shui)(shui)。（W和B的(de)(de)值(zhi)應經過(guo)實地三(san)級培養和收集藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)后才知道近(jin)(jin)似數(shu)值(zhi)）。
