對蝦(xia)種苗(miao)(miao)(miao)(miao)(miao)企業(ye)的(de)(de)(de)生存(cun)主要是(shi)依靠(kao)蝦(xia)苗(miao)(miao)(miao)(miao)(miao)養(yang)殖效果來決定的(de)(de)(de)，蝦(xia)苗(miao)(miao)(miao)(miao)(miao)成活(huo)率的(de)(de)(de)高低(di)直(zhi)接影響著產業(ye)鏈(lian)的(de)(de)(de)上上下(xia)下(xia)。單(dan)(dan)胞(bao)藻(zao)(zao)對于蝦(xia)苗(miao)(miao)(miao)(miao)(miao)早期是(shi)最適合(he)的(de)(de)(de)餌料，如果培育(yu)(yu)(yu)得當(dang)，不(bu)僅可以(yi)節約成本，減少育(yu)(yu)(yu)苗(miao)(miao)(miao)(miao)(miao)水(shui)體環境負荷，尤(you)其是(shi)對于蝦(xia)苗(miao)(miao)(miao)(miao)(miao)的(de)(de)(de)發(fa)育(yu)(yu)(yu)打下(xia)堅(jian)實(shi)的(de)(de)(de)基礎，提高成活(huo)率。結合(he)個(ge)人(ren)的(de)(de)(de)育(yu)(yu)(yu)苗(miao)(miao)(miao)(miao)(miao)感受，投(tou)(tou)喂(wei)單(dan)(dan)胞(bao)藻(zao)(zao)與不(bu)投(tou)(tou)喂(wei)的(de)(de)(de)區別還是(shi)有的(de)(de)(de)，比(bi)如苗(miao)(miao)(miao)(miao)(miao)的(de)(de)(de)變態(tai)時(shi)間縮短，活(huo)力(li)個(ge)頭大(da)小，水(shui)質均優于未(wei)投(tou)(tou)喂(wei)單(dan)(dan)胞(bao)藻(zao)(zao)的(de)(de)(de)苗(miao)(miao)(miao)(miao)(miao)，當(dang)然如果培育(yu)(yu)(yu)不(bu)得當(dang)，反作用(yong)也有，比(bi)如投(tou)(tou)喂(wei)有害菌(jun)超標的(de)(de)(de)藻(zao)(zao)液，藻(zao)(zao)類老化(hua)，投(tou)(tou)喂(wei)過量等(deng)。所以(yi)合(he)理(li)運用(yong)，方(fang)可收到(dao)理(li)想效果。限于個(ge)人(ren)水(shui)平，描述方(fang)法的(de)(de)(de)錯誤不(bu)足之處，懇請大(da)家指正(zheng)。
一 、單胞藻純培養室操作描述
儀器使用
（1） 超(chao)凈工作臺
使用前提前開(kai)機，打開(kai)紫(zi)外線燈和風(feng)機開(kai)關(guan)20分鐘。超(chao)凈臺(tai)(tai)面上不存放不必要的(de)物(wu)品，保持(chi)工(gong)作(zuo)區內(nei)的(de)凈化氣流(liu)不受(shou)干擾，工(gong)作(zuo)時盡(jin)量避免作(zuo)明(ming)顯干擾氣流(liu)的(de)動(dong)作(zuo)；超(chao)凈臺(tai)(tai)保持(chi)光滑水(shui)平，光滑便于用酒精消毒(du)布擦，水(shui)平是倒培養基時使培養皿內(nei)平板厚度一(yi)致。工(gong)作(zuo)時超(chao)凈臺(tai)(tai)周(zhou)圍空氣流(liu)動(dong)要緩慢，雜(za)菌盡(jin)量減少(shao)，所以要定期清(qing)潔(jie)消毒(du)保種(zhong)室(shi)內(nei)，關(guan)閉門窗，盡(jin)可能減少(shao)雜(za)菌數量；空氣過濾網定期清(qing)潔(jie)。
（2）真(zhen)空泵和溶(rong)劑過濾器及(ji)過濾膜
此(ci)環(huan)節過(guo)濾只是為單胞藻純培(pei)養室（保種，提純，擴培(pei)試管級(ji)）準備清潔(jie)無(wu)菌海水。其(qi)他級(ji)別的培(pei)養無(wu)需此(ci)環(huan)節。
過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)膜使用(yong)0.2微米孔徑，不可用(yong)手拿，用(yong)鑷(nie)子選取。真空(kong)(kong)泵與溶劑過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)器之(zhi)間(jian)通過(guo)(guo)合(he)適口徑的橡(xiang)膠管連接緊密，每次過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)要注意濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)膜的過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)效果(guo)，防(fang)止(zhi)濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)孔阻塞影(ying)響過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)效果(guo)。濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)瓶內的濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)液不能沒(mei)過(guo)(guo)濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)板出水口，否則濾(lv)(lv)(lv)(lv)(lv)液將被抽吸入真空(kong)(kong)泵，導(dao)致真空(kong)(kong)泵損壞。
應(ying)該使濾(lv)板內的營養液過濾(lv)盡后(hou)（無水滴）才能停泵。要定期注意(yi)真空(kong)泵內油量，注意(yi)加油。
(3) 恒溫鼓風干燥箱
設定(ding)(ding)溫(wen)度(du)時(shi)。先按控(kong)溫(wen)儀功(gong)(gong)能鍵SET進(jin)入溫(wen)度(du)設定(ding)(ding)狀態，此時(shi)SP設定(ding)(ding)顯示(shi)一(yi)閃一(yi)閃，要(yao)按移(yi)動(dong)位鍵配(pei)合(he)加鍵或減鍵，設定(ding)(ding)時(shi)先從(cong)分(fen)位數字設定(ding)(ding)，一(yi)直到百位數，設定(ding)(ding)結束需(xu)按一(yi)下功(gong)(gong)能鍵SET,此時(shi)干燥箱進(jin)入升溫(wen)狀態，加熱指(zhi)示(shi)燈(deng)亮，當(dang)箱內溫(wen)度(du)接近設定(ding)(ding)溫(wen)度(du)時(shi)，加熱指(zhi)示(shi)燈(deng)閃動(dong)多次，控(kong)制進(jin)入恒溫(wen)狀態。
使用注意(yi)事項(xiang)：物(wu)品不能堆(dui)得太(tai)滿，更(geng)不能堵住出風口，以免影響溫(wen)(wen)度(du)均勻上升。若是有(you)牛皮紙和保鮮膜時(shi)，溫(wen)(wen)度(du)不能超過(guo)180度(du)。取(qu)出物(wu)品時(shi)，箱(xiang)內外(wai)溫(wen)(wen)差不宜過(guo)高，防止玻璃器皿炸裂。橡膠制品不能放入。
（4）加濕器
配合生化培養箱(xiang)使(shi)用(yong)。
水(shui)(shui)(shui)源(yuan)是蒸餾水(shui)(shui)(shui)；不應容(rong)器(qi)內帶水(shui)(shui)(shui)移動加濕器(qi)；加水(shui)(shui)(shui)時應在(zai)容(rong)器(qi)上(shang)表示的滿水(shui)(shui)(shui)線為止。
應注意(yi)的(de)事項：平(ping)時(shi)留意(yi)觀察水箱的(de)存水量(liang)，及時(shi)予以補(bu)充，遠(yuan)離熱源(yuan)，腐蝕物。
（5）蒸(zheng)汽(qi)消毒器
容(rong)器加(jia)水(shui)時(shi)，水(shui)位(wei)一定(ding)要(yao)超過電(dian)熱管，最好是到3個支(zhi)撐點的下緣，如果連續使用(yong)，應在每次(ci)消(xiao)毒前補足蒸發水(shui)量，不然少水(shui)會燒(shao)壞電(dian)熱管。蓋(gai)上(shang)的放氣(qi)軟管插入消(xiao)毒桶圓槽內，對(dui)正蓋(gai)和主體的螺栓槽，依次(ci)將相對(dui)方的翼型(xing)螺母予以(yi)旋(xuan)緊(jin)，使蓋(gai)與(yu)主體密(mi)合，加(jia)熱開始時(shi)，應將放氣(qi)閥與(yu)安(an)全閥的小(xiao)手(shou)柄扳至垂直放氣(qi)方位(wei)，必須待有較急蒸汽(qi)噴出，即將小(xiao)手(shou)柄扳回水(shui)平“關閉(bi)”方位(wei)。
當到達所需壓(ya)力和(he)溫度，計算消(xiao)毒(du)時間，消(xiao)毒(du)畢后(hou)，關閉電源，待壓(ya)力指(zhi)針指(zhi)向0時，將放氣閥(fa)的小手(shou)柄扳至垂直放氣方位，氣放完后(hou)，打開(kai)容器蓋。物品消(xiao)毒(du)后(hou)要(yao)迅速干燥。
應注意滅菌液體時(shi)，不(bu)超過盛液體容器體積的(de)3/4，瓶塞(sai)不(bu)可用軟木塞(sai)或未打孔的(de)橡膠塞(sai)。滅菌器內冷空(kong)氣(qi)(qi)必(bi)須完(wan)全排(pai)除。因(yin)為空(kong)氣(qi)(qi)的(de)膨(peng)(peng)脹(zhang)壓(ya)(ya)(ya)(ya)大于水(shui)蒸氣(qi)(qi)的(de)膨(peng)(peng)脹(zhang)壓(ya)(ya)(ya)(ya)，當水(shui)蒸氣(qi)(qi)含冷空(kong)氣(qi)(qi)時(shi)，壓(ya)(ya)(ya)(ya)力表所表示的(de)壓(ya)(ya)(ya)(ya)力是(shi)(shi)水(shui)蒸氣(qi)(qi)壓(ya)(ya)(ya)(ya)力和部分冷空(kong)氣(qi)(qi)壓(ya)(ya)(ya)(ya)力之和，不(bu)是(shi)(shi)水(shui)蒸氣(qi)(qi)的(de)實(shi)際壓(ya)(ya)(ya)(ya)力，而同(tong)一壓(ya)(ya)(ya)(ya)力下(xia)的(de)實(shi)際溫度，含空(kong)氣(qi)(qi)的(de)蒸汽低于飽和蒸汽，這樣導致(zhi)達不(bu)了消毒效果。絕不(bu)可堵塞(sai)安全閥出氣(qi)(qi)孔，必(bi)須留空(kong)位保證(zheng)其暢(chang)通放氣(qi)(qi)，發現超溫超壓(ya)(ya)(ya)(ya)，立即斷電。
蒸餾器
先(xian)關閉放水(shui)(shui)閥，打(da)開(kai)進(jin)水(shui)(shui)閥，待溢水(shui)(shui)皮管(guan)(guan)有(you)(you)水(shui)(shui)流出(chu)，方可接(jie)通電源(yuan)，此時可暫時關閉進(jin)水(shui)(shui)閥，待出(chu)水(shui)(shui)皮管(guan)(guan)有(you)(you)蒸餾(liu)水(shui)(shui)流出(chu)，打(da)開(kai)進(jin)水(shui)(shui)閥，制備蒸餾(liu)水(shui)(shui)。定(ding)期清洗蒸餾(liu)器內壁(bi)，除去(qu)水(shui)(shui)垢，不然(ran)影響(xiang)蒸餾(liu)水(shui)(shui)質量和使用效果。切(qie)不可關閉水(shui)(shui)閥制備蒸餾(liu)水(shui)(shui)，否則(ze)燒壞電熱管(guan)(guan)。
（6）鼓風機
定期更換(huan)吸氣(qi)口的過(guo)濾(lv)棉(mian)，異常(chang)情況，請電工檢(jian)查。
（7）空調
保(bao)種室(shi)若有(you)生長(chang)藻種，需維持恒定溫(wen)(wen)度(du)，反之關閉。一(yi)級(ji)，二級(ji)空調視外界氣溫(wen)(wen)調整開關。
二 、衛生消毒
工具衛生消毒
1、濾(lv)水筒式(shi)過濾(lv)器(qi)。筒式(shi)過濾(lv)器(qi)的濾(lv)芯應(ying)用(yong)(yong)一次(ci)更換一次(ci)，用(yong)(yong)過的濾(lv)芯浸(jin)泡在1%鹽酸(suan)溶液中消毒12h以上。然后用(yong)(yong)洗(xi)(xi)潔精清洗(xi)(xi)，再用(yong)(yong)足量清水沖(chong)洗(xi)(xi)干凈，晾干備用(yong)(yong)。（濾(lv)芯規格應(ying)小于(yu)等于(yu)0.5微米）。
2、試管(guan)(guan)（規(gui)格10毫升(sheng)到20毫升(sheng)），錐形(xing)瓶(ping)（50毫升(sheng)到200毫升(sheng)），500ml錐形(xing)瓶(ping)，2.5L瓶(ping)廣口(kou)瓶(ping)，移(yi)液管(guan)(guan)，移(yi)液槍(qiang)管(guan)(guan)/盒，玻璃氣(qi)(qi)管(guan)(guan)，膠氣(qi)(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)(qi)石(shi)，溶劑過(guo)(guo)濾器(qi)，培養皿。用過(guo)(guo)后(hou)應(ying)當用清(qing)(qing)水(shui)清(qing)(qing)洗(xi)(xi)(xi)后(hou)浸泡于1% 鹽(yan)酸12h以上（溶劑過(guo)(guo)濾器(qi)除外，浸泡時(shi)相(xiang)近大小器(qi)皿分類(lei)放不同的消毒桶，規(gui)格相(xiang)差大，易導致相(xiang)互碰撞碎(sui)爛）然后(hou)用洗(xi)(xi)(xi)潔(jie)精清(qing)(qing)洗(xi)(xi)(xi)(用毛刷清(qing)(qing)洗(xi)(xi)(xi)試管(guan)(guan)底部(bu)時(shi)，不可太用力，否(fou)則(ze)底部(bu)易破裂)，再用大量清(qing)(qing)水(shui)沖(chong)洗(xi)(xi)(xi)干(gan)凈，風(feng)干(gan)或曬干(gan)，高壓滅菌(jun)后(hou)，放入恒溫干(gan)燥箱（膠氣(qi)(qi)管(guan)(guan)，氣(qi)(qi)石(shi)除外）干(gan)燥備用。
3、聚乙烯藻(zao)袋(dai)用(yong)于二(er)級藻(zao)類藻(zao)種(zhong)掛袋(dai)培(pei)養或3級擴(kuo)培(pei)（一(yi)般使用(yong)盛裝藻(zao)液12升左右）。先用(yong)清水沖洗(xi)干凈(jing)內外，浸泡(pao)于1% 鹽(yan)酸12h以(yi)上(shang)，再用(yong)大量清水沖洗(xi)干凈(jing)，風干或曬干，備用(yong)。由于藻(zao)袋(dai)近似密封性，對于防(fang)止微生物污染有很好的效果。
4、毛巾、保種室，一級(ji)和二級(ji)毛巾不可(ke)混用(yong)，所用(yong)毛巾后都(dou)應消毒清洗晾干后備用(yong)。
5、錫箔紙：除非(fei)粘(zhan)上油污或污物以及破損，都應重復(fu)使用。
6、牛(niu)皮紙：定期(qi)拿到烘箱烘干。
7、定(ding)期更換空(kong)氣過濾(lv)(lv)器（用于1，2級培(pei)養的進(jin)氣過濾(lv)(lv)）的濾(lv)(lv)芯，濾(lv)(lv)芯已(yi)油化(hua)或沖散的棄(qi)去。
8、定期更換鼓風機(ji)進風口的過(guo)濾(lv)棉(mian)。
9、對(dui)新購入的(de)器皿應(ying)先除去(qu)包裝(zhuang)沾(zhan)染的(de)污垢后，用(yong)洗潔精刷洗，流(liu)水沖凈，再(zai)(zai)浸泡于1%的(de)鹽(yan)酸12h，使游離的(de)堿(jian)性物(wu)質除去(qu)，再(zai)(zai)用(yong)清水沖洗干凈，風干或曬(shai)干備(bei)用(yong)。
室內衛生消毒
1、保種室每天早上用清水擦洗實驗臺面，地(di)板，墻壁(bi)，木架后(hou)，開(kai)紫(zi)外(wai)燈(deng)消毒20分鐘，此時(shi)關掉空調，關掉日光燈(deng)，由(you)于(yu)紫(zi)外(wai)燈(deng)照(zhao)射會產生一定(ding)量的臭(chou)氧(yang)，對人(ren)體有害，所以消毒關閉紫(zi)外(wai)燈(deng)后(hou)人(ren)應隔一段(duan)時(shi)間再進(jin)(jin)去。進(jin)(jin)保種室換鞋。
2、一級和二級室每(mei)天清潔，接種前接種后承載物框架都應(ying)用(yong)消毒液(ye)消毒。
3、門口消(xiao)毒(du)池定期更(geng)換消(xiao)毒(du)藥(yao)水（高錳酸鉀(jia)）。
4、常用消(xiao)毒(du)劑濃度 1%鹽酸，次氯酸鈉20ppm（有效(xiao)氯），碘(dian)液（1000ppm）,酒精70-75%,高錳酸鉀1mg/L。
三 、接種
藻種固體培養基制備
所需燒(shao)杯(bei)，玻棒須清(qing)洗干凈(jing)，錐(zhui)形瓶和(he)培(pei)養(yang)皿須消毒(du)清(qing)洗滅菌烘干。將(jiang)稱好的(de)純(chun)化(hua)瓊(qiong)(qiong)脂粉(fen)加(jia)入燒(shao)杯(bei)再(zai)加(jia)入一定(ding)量(liang)的(de)海水(shui)，加(jia)熱（必須不停攪拌(ban)，以免瓊(qiong)(qiong)脂糊底燒(shao)焦）至完(wan)全融化(hua)，加(jia)熱后(hou)(hou)的(de)瓊(qiong)(qiong)脂培(pei)養(yang)基應當透明(ming)無(wu)顯(xian)著(zhu)沉淀，若明(ming)顯(xian)，可采(cai)用清(qing)潔的(de)白色(se)薄(bo)絨布或中間夾有(you)薄(bo)層吸水(shui)棉的(de)雙層紗布鋪在漏斗上趁熱過濾(lv)，融化(hua)畢后(hou)(hou)精確加(jia)入營養(yang)鹽(yan)（維生素B溶(rong)液須等培(pei)養(yang)基高壓滅菌后(hou)(hou)冷卻至50攝氏度以下再(zai)加(jia)）。
培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)采用121攝氏(shi)度(du)高壓(ya)蒸汽(qi)滅菌(jun)20至30分(fen)鐘(zhong)即可(ke)，培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)滅菌(jun)后(hou)(hou)應(ying)立即取出，冷(leng)卻至50攝氏(shi)度(du)以下，即加(jia)維(wei)生(sheng)素B溶液(ye)。將盛裝培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)的錐形瓶和培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿放在(zai)超凈(jing)工作臺上，點燃(ran)酒精燈，右手托起錐形瓶底，將瓶口(kou)在(zai)酒精燈稍(shao)加(jia)燒，然后(hou)(hou)迅速將培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)倒入培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿中(zhong)，以鋪滿皿底為止（厚(hou)薄適中(zhong)）。鋪放好后(hou)(hou)，放置20-30分(fen)鐘(zhong)，待培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)凝固后(hou)(hou)，即開始操作。
若是做斜面(mian)培養(yang)基，則加入(ru)維生素B溶(rong)液后(hou)，將(jiang)盛裝(zhuang)(zhuang)培養(yang)基的錐形瓶和(he)試管以(yi)及一根厚約(yue)(yue)1厘米的小(xiao)木板放(fang)在超凈(jing)工作(zuo)(zuo)臺上。分(fen)裝(zhuang)(zhuang)約(yue)(yue)為試管高度的1/3-2/3（視情(qing)況(kuang)操作(zuo)(zuo)），分(fen)裝(zhuang)(zhuang)量應(ying)以(yi)能(neng)形成2/3底層和(he)1/3斜面(mian)量為好，擺(bai)置成適當(dang)斜面(mian)，待(dai)其自(zi)然凝固(gu)。培養(yang)基制備(bei)好后(hou)，如發現破裂，水分(fen)浸入(ru)，色(se)澤(ze)異常等均應(ying)棄去.
待凝(ning)固(gu)后即進行操(cao)作，現一般采用平板(ban)劃線接種(zhong)和涂布接種(zhong)。
平板劃線接種
接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)在酒(jiu)精燈(deng)火焰上(shang)(shang)充分燒紅后(hou)，接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)柄(bing)一(yi)(yi)邊(bian)轉動(dong)一(yi)(yi)邊(bian)慢慢來回(hui)通(tong)過火焰3次，待冷卻至(zhi)室(shi)溫(wen)方可(ke)(ke)挑取藻(zao)種(zhong)(zhong)(zhong)（為保證藻(zao)種(zhong)(zhong)(zhong)不(bu)被燙(tang)死，挑種(zhong)(zhong)(zhong)前可(ke)(ke)將(jiang)接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)接(jie)(jie)(jie)(jie)觸(chu)(chu)培養(yang)(yang)皿(min)(min)(min)內(nei)壁(bi)或培養(yang)(yang)基），迅速(su)接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)至(zhi)新培養(yang)(yang)基（劃(hua)線可(ke)(ke)采(cai)用(yong)(yong)斜線法，方格法，曲線法，放射法等）。左(zuo)手握住平(ping)(ping)板，用(yong)(yong)大(da)拇指(zhi)和食(shi)(shi)指(zhi)稍稍抬起皿(min)(min)(min)蓋(gai)，同時(shi)靠近火焰周圍(wei)，右手持接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)伸入(ru)皿(min)(min)(min)內(nei)，在平(ping)(ping)板上(shang)(shang)一(yi)(yi)個區域作劃(hua)線（依(yi)方法不(bu)同，動(dong)作不(bu)同）。劃(hua)線時(shi)使接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)與平(ping)(ping)板表面(mian)(mian)成(cheng)30-40度角(jiao)輕輕接(jie)(jie)(jie)(jie)觸(chu)(chu)，以(yi)腕(wan)力在表面(mian)(mian)作較快的(de)滑(hua)動(dong)（注意(yi)不(bu)要劃(hua)破平(ping)(ping)板表面(mian)(mian)或伸進培養(yang)(yang)基內(nei)）。接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)挑種(zhong)(zhong)(zhong)后(hou)和劃(hua)線完(wan)抽出時(shi)均不(bu)可(ke)(ke)碰及皿(min)(min)(min)壁(bi)/口(kou)(kou)(kou)，更不(bu)能碰其(qi)它物(wu)體和臺面(mian)(mian)。接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)完(wan)后(hou)，將(jiang)接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)從柄(bing)部至(zhi)環(huan)(huan)(huan)端逐漸(jian)通(tong)過酒(jiu)精燈(deng)火焰滅菌(jun)，不(bu)能直接(jie)(jie)(jie)(jie)燒環(huan)(huan)(huan)，以(yi)免殘留在接(jie)(jie)(jie)(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)環(huan)(huan)(huan)上(shang)(shang)的(de)藻(zao)體或菌(jun)體爆濺污染空間(jian)。上(shang)(shang)述操作完(wan)成(cheng)后(hou)，即(ji)用(yong)(yong)無(wu)菌(jun)封(feng)口(kou)(kou)(kou)膜(mo)封(feng)培養(yang)(yang)皿(min)(min)(min)口(kou)(kou)(kou)（膜(mo)使用(yong)(yong)前須用(yong)(yong)酒(jiu)精消毒(du)，紫外(wai)燈(deng)消毒(du)，風(feng)干），封(feng)口(kou)(kou)(kou)時(shi)，用(yong)(yong)左(zuo)手大(da)拇指(zhi)摁(en)住膜(mo)一(yi)(yi)邊(bian)末端，右手大(da)拇指(zhi)和食(shi)(shi)指(zhi)捏住另一(yi)(yi)邊(bian)末端，迅速(su)繞培養(yang)(yang)皿(min)(min)(min)口(kou)(kou)(kou)繞一(yi)(yi)圈，封(feng)口(kou)(kou)(kou)。
涂布接種
所(suo)用種液必須(xu)經過弧菌檢測(ce)合格后方(fang)可使用。涂布(bu)(bu)棒在火焰(yan)上慢慢來回(hui)過火焰(yan)3次，冷(leng)(leng)卻（不可驟(zou)冷(leng)(leng)），將(jiang)種液用移液槍從(cong)試管(guan)吸出注(zhu)入平板(ban)上面(mian)（槍管(guan)不可碰及試管(guan)外(wai)壁，更不能碰及其它(ta)物(wu)品或臺面(mian)），迅速用涂布(bu)(bu)棒在表面(mian)作來回(hui)左(zuo)右的涂布(bu)(bu)，讓藻液分布(bu)(bu)均勻，畢后，封口同平板(ban)劃線。
試管液體培養基接種
所用(yong)種(zhong)液必(bi)須(xu)經(jing)過弧菌(jun)檢測(ce)合格后方(fang)可(ke)使(shi)用(yong)。火(huo)焰(yan)滅(mie)(mie)菌(jun)前試管(guan)口(kou)外壁(bi)不(bu)(bu)能(neng)(neng)有水滴（易導致受(shou)熱不(bu)(bu)均而破裂(lie)）,燒試管(guan)口(kou)時(shi)，試管(guan)傾斜45度角，不(bu)(bu)斷移(yi)動試管(guan)，使(shi)試管(guan)口(kou)受(shou)熱均勻(yun)，滅(mie)(mie)菌(jun)時(shi)間3秒(miao)左右。滅(mie)(mie)菌(jun)后不(bu)(bu)能(neng)(neng)驟冷，防止試管(guan)破裂(lie)。畢后，用(yong)盛(sheng)裝(zhuang)營(ying)(ying)養液150或200ml的錐(zhui)形(xing)瓶（也(ye)要滅(mie)(mie)菌(jun)瓶口(kou)）向試管(guan)中傾倒營(ying)(ying)養液，每次只能(neng)(neng)拿(na)一個試管(guan)（注：若(ruo)幾個試管(guan)對比(bi)時(shi)，可(ke)以同(tong)時(shi)拿(na)在(zai)手(shou)里，用(yong)大拇指和手(shou)掌），倒好(hao)后，同(tong)樣試管(guan)和錐(zhui)形(xing)瓶口(kou)滅(mie)(mie)菌(jun)，試管(guan)塞也(ye)要滅(mie)(mie)菌(jun)，塞試管(guan)塞時(shi)不(bu)(bu)要移(yi)動試管(guan)迎(ying)接塞，以免(mian)試管(guan)在(zai)移(yi)動中納入可(ke)能(neng)(neng)含菌(jun)空(kong)氣，火(huo)焰(yan)旁為(wei)無菌(jun)。
所(suo)有試(shi)(shi)(shi)(shi)管(guan)分(fen)裝好后(hou)，即接種(zhong)。用(yong)(yong)移液槍(qiang)(qiang)選取(qu)(qu)移液量（試(shi)(shi)(shi)(shi)管(guan)口滅菌），注入(ru)新培(pei)養(yang)基(ji)，槍(qiang)(qiang)管(guan)不(bu)可(ke)碰(peng)(peng)及(ji)管(guan)外(wai)壁，更不(bu)能(neng)(neng)碰(peng)(peng)及(ji)其它(ta)物品或臺面(mian)，一支(zhi)槍(qiang)(qiang)管(guan)只能(neng)(neng)和同(tong)一種(zhong)液使(shi)用(yong)(yong)，選取(qu)(qu)另一試(shi)(shi)(shi)(shi)管(guan)種(zhong)液時必(bi)須更換槍(qiang)(qiang)頭。接種(zhong)畢后(hou)，選取(qu)(qu)合(he)適光照溫度培(pei)養(yang)。由于試(shi)(shi)(shi)(shi)管(guan)培(pei)養(yang)是靜置(zhi)培(pei)養(yang)，而(er)在(zai)靜置(zhi)條(tiao)件下(xia)，藻(zao)細胞(bao)(bao)會聚集在(zai)試(shi)(shi)(shi)(shi)管(guan)底部(bu)，且(qie)藻(zao)細胞(bao)(bao)周圍會形成(cheng)透過養(yang)分(fen)的屏障，營(ying)(ying)養(yang)鹽的攝入(ru)受阻，光照吸(xi)收不(bu)均，為使(shi)營(ying)(ying)養(yang)鹽攝入(ru)正常，藻(zao)細胞(bao)(bao)受光均勻，需要(yao)(yao)定時搖置(zhi)試(shi)(shi)(shi)(shi)管(guan)（手先噴消(xiao)毒酒(jiu)精，手腕(wan)使(shi)勁搖，不(bu)要(yao)(yao)擺(bai)臂，不(bu)能(neng)(neng)倒置(zhi)搖）
三角瓶，500ml瓶，2.5L瓶液體培養基接種
三角瓶(ping)接種(zhong)(zhong)需(xu)無(wu)菌(jun)操(cao)作。500ml瓶(ping)，2.5L瓶(ping)液體培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)接種(zhong)(zhong)均(jun)在室內衛生(sheng)條件下(xia)操(cao)作。3種(zhong)(zhong)瓶(ping)和所(suo)需(xu)營養(yang)(yang)(yang)液及錫(xi)紙，移液管，洗耳(er)球，氣(qi)管，氣(qi)石(shi)均(jun)需(xu)經(jing)消(xiao)毒清洗，滅菌(jun)后使(shi)用。三角瓶(ping)需(xu)定時(shi)搖置，500ml，2.5L瓶(ping)培(pei)養(yang)(yang)(yang)在通氣(qi)條件下(xia)培(pei)養(yang)(yang)(yang)。
二級聚乙烯藻袋液體培養基接種
氣(qi)管(guan)，氣(qi)石均需經消毒清洗(xi)，滅菌后使(shi)用(yong)(yong)，抽藻(zao)(zao)管(guan)前次(ci)用(yong)(yong)畢后應(ying)(ying)當(dang)用(yong)(yong)水泵將管(guan)內(nei)灌滿消毒鹽酸(suan)溶液，今次(ci)用(yong)(yong)前需用(yong)(yong)海水或淡水沖洗(xi)干(gan)凈后使(shi)用(yong)(yong)。選取的(de)種液應(ying)(ying)當(dang)是無(wu)明顯沉淀，泡沫，原生(sheng)動物(wu)，附著物(wu)，色澤正常(chang)(chang)，藻(zao)(zao)細胞密度大，形態正常(chang)(chang)，弧菌檢測(ce)(ce)合格后選用(yong)(yong)。所(suo)用(yong)(yong)海水漂(piao)白(bai)(bai)水消毒有效氯應(ying)(ying)足10ppm，曝氣(qi)12小(xiao)時，檢測(ce)(ce)余氯，加硫代硫酸(suan)鈉中和，方可(ke)使(shi)用(yong)(yong)。若使(shi)用(yong)(yong)稀釋的(de)漂(piao)白(bai)(bai)水，應(ying)(ying)當(dang)天(tian)配制當(dang)天(tian)使(shi)用(yong)(yong)，而(er)未使(shi)用(yong)(yong)的(de)要(yao)(yao)在24小(xiao)時后棄去。且稀釋的(de)漂(piao)白(bai)(bai)水必須加蓋放在避光(guang)的(de)容(rong)器內(nei)保存。由(you)于(yu)漂(piao)白(bai)(bai)水會隨(sui)時間漸(jian)漸(jian)分解，一次(ci)性購入的(de)漂(piao)白(bai)(bai)水不應(ying)(ying)太多，不要(yao)(yao)過(guo)量儲存，以(yi)免影響滅菌功效。
1,2，3級接藻示意
試管→三角瓶(ping)→500ml瓶(ping)子→2500ml瓶(ping)子→20升(sheng)的藻(zao)種聚乙烯袋 →18升(sheng)的擴培(pei)(pei)藻(zao)聚乙烯袋或(huo)者培(pei)(pei)藻(zao)池
相關說明
1、母液的配置可(ke)以(yi)參考教科書上所寫，然后結合當地的水質適當修改(gai)即可(ke)。氮，磷，鐵元素(su)(su)，維生(sheng)素(su)(su)B1,B12是必須(xu)使用,維生(sheng)素(su)(su)母液保(bao)存于低溫弱光環境(jing)下，其(qi)中維生(sheng)素(su)(su)的添加(jia)需要先(xian)高(gao)壓滅(mie)菌(jun)后再加(jia)入母液中。其(qi)余營養(yang)鹽(yan)先(xian)配置好后，再滅(mie)菌(jun)。如果是硅(gui)藻類，還應加(jia)上硅(gui)酸鈉。
2、保(bao)種室所需(xu)營(ying)養(yang)液（母(mu)液千分之0.8的比例添加）除需(xu)高壓(ya)滅菌外還(huan)必須經過真空泵抽濾后才能(neng)用(yong)，微孔濾膜直徑為(wei)50毫(hao)米(mi)，孔徑為(wei)0.2微米(mi)。
3、接(jie)種(zhong)(zhong)比(bi)例(li)A:試(shi)管(guan)0.07—0.09（隨密度大小變化），10毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)試(shi)管(guan)加營(ying)養液(ye)(ye)7毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，藻種(zhong)(zhong)0.5毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，20毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)試(shi)管(guan)中營(ying)養液(ye)(ye)加12.5毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)養液(ye)(ye)，1毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)藻種(zhong)(zhong)。B:三(san)角(jiao)(jiao)瓶(ping)0.09-0.11。在100毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，150毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，200毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)，250毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)三(san)角(jiao)(jiao)瓶(ping)中分別加營(ying)養液(ye)(ye)，70，80，120，150毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)（可(ke)按(an)一試(shi)管(guan)對應(ying)一個(ge)(ge)三(san)角(jiao)(jiao)瓶(ping)加入(ru)），C: 500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)（400毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)養液(ye)(ye)）(按(an)1個(ge)(ge)三(san)角(jiao)(jiao)瓶(ping)對應(ying)1個(ge)(ge)500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)加入(ru))D:2.5升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)（2升(sheng)(sheng)(sheng)營(ying)養液(ye)(ye)）（按(an)1個(ge)(ge)500毫(hao)(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)對應(ying)1個(ge)(ge)2.5升(sheng)(sheng)(sheng)瓶(ping)加入(ru)），注意：上述若發現(xian)藻生長情況不好，需要先鏡(jing)檢，判(pan)斷后(hou)再決定是否接(jie)種(zhong)(zhong)。
一般情況(kuang)下3袋二級藻種應先擴培接(jie)種于(yu)容(rong)量(liang)400升的桶（海水貯(zhu)備及營養液提前(qian)配置好），然后立(li)即進(jin)行二級藻袋擴種，每個聚(ju)乙烯袋加(jia)18升左右藻水。
4、保(bao)種培(pei)養基制備：按1.5%的(de)比例加(jia)瓊脂(zhi)粉(fen)，煮沸(fei)后加(jia)營養鹽（母液千分之1添加(jia)），高壓(ya)滅菌(jun)(jun)。維(wei)生素需高壓(ya)滅菌(jun)(jun)后培(pei)養基冷卻至30攝氏度方可加(jia)入(ru)。（可用(yong)劃線法(fa)，涂布法(fa)等分離培(pei)養藻種）。
5、儀(yi)器的(de)清(qing)洗維護。溶(rong)(rong)劑(ji)過(guo)濾器使(shi)用(yong)(yong)(yong)后只(zhi)用(yong)(yong)(yong)洗潔(jie)精(jing)和清(qing)水清(qing)洗。高壓滅(mie)菌后備用(yong)(yong)(yong)。其(qi)它玻(bo)璃儀(yi)器，氣管，氣石(shi)，移液槍筒使(shi)用(yong)(yong)(yong)后需要浸泡在(zai)百(bai)分(fen)之一到百(bai)分(fen)之十的(de)稀鹽酸溶(rong)(rong)液中至(zhi)少半天，才能拿出清(qing)洗，風干(gan)，高壓滅(mie)菌后備用(yong)(yong)(yong)。
說明：10的2次方(fang)標(biao)示(shi)成10^2，以下(xia)數字的次方(fang)通用此表示(shi)法(fa)
三級藻生產
三級藻(zao)(zao)系統包括用水處理以(yi)及配送，溫度與光照控制，藻(zao)(zao)種的供(gong)應等。為確保擴(kuo)大(da)培(pei)養(yang)(yang)(yang)成功，從接種到收(shou)獲的培(pei)養(yang)(yang)(yang)時間應該(gai)盡量(liang)縮(suo)短，以(yi)避免因(yin)為開放式培(pei)養(yang)(yang)(yang)隨培(pei)養(yang)(yang)(yang)規模擴(kuo)大(da)接觸外界感染源時間加長，三級藻(zao)(zao)池滋(zi)生(sheng)過多(duo)的有害生(sheng)物，使三級培(pei)養(yang)(yang)(yang)失敗。
1—1高水(shui)(shui)(shui)位(wei)低(di)密(mi)度(du)接(jie)(jie)種（接(jie)(jie)種密(mi)度(du)為P×10^4cell/ml,P為接(jie)(jie)種密(mi)度(du)萬位(wei)數值）（未特別(bie)說明藻(zao)水(shui)(shui)(shui)藻(zao)細(xi)胞密(mi)度(du)就是(shi)cell/ml）（以下(xia)的(de)推理是(shi)建立在三級(ji)藻(zao)第二次加(jia)水(shui)(shui)(shui)和收獲的(de)密(mi)度(du)為105級(ji)）
若一(yi)天三(san)(san)級濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求(qiu)量為(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)(sheng)，則(ze)(ze)總藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)目(mu)為(wei)(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell(K為(wei)(wei)(wei)(wei)A升(sheng)(sheng)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)(wei)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)(mi)(mi)度千(qian)萬位的數(shu)值(zhi)),一(yi)般情況下二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)的密(mi)(mi)(mi)(mi)度為(wei)(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)(wei)二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)(mi)(mi)度百萬位的數(shu)值(zhi)),若第(di)一(yi)天接種(zhong)E噸藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)，則(ze)(ze)一(yi)天需要二(er)級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)體(ti)積(ji)d=E×10^6×P×104/C×10^6=EP×10/C升(sheng)(sheng)，第(di)三(san)(san)天加(jia)水(shui)(shui)F噸，此時加(jia)水(shui)(shui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)(mi)度E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)(wei)第(di)三(san)(san)天加(jia)F噸水(shui)(shui)之(zhi)前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)(mi)度十(shi)(shi)萬位數(shu)值(zhi)），然后(hou)第(di)五天收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)總數(shu)目(mu)應為(wei)(wei)(wei)(wei)H=（E+F）×10^5×Z×10^6(Z為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)密(mi)(mi)(mi)(mi)度十(shi)(shi)萬位數(shu),H為(wei)(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)總數(shu)目(mu))，因(yin)為(wei)(wei)(wei)(wei)總需求(qiu)量的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)目(mu)應等于最后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)總數(shu)目(mu)，則(ze)(ze)K=H,則(ze)(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F）×10^6×Z×10^5經過計算是A×B=(E+F)×10×Z。
舉例
若(ruo)(ruo)一(yi)天(tian)(tian)需(xu)濃(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)320升，則(ze)(ze)A=320，(一(yi)般情況下E和(he)F的(de)值(zhi)接近(jin))，則(ze)(ze)因為K=H,所以320×B=20EZ,即(ji)320B=20EZ，E=16B/Z,即(ji)B/Z噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)可以收(shou)(shou)集濃(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)20升(B為濃(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)密度(du)千萬位的(de)數(shu)值(zhi),Z為藻(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)水(shui)密度(du)十萬位數(shu))，即(ji)若(ruo)(ruo)一(yi)天(tian)(tian)需(xu)要濃(nong)(nong)縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)A升，則(ze)(ze)每天(tian)(tian)應接種E=AB÷20Z噸(dun)水(shui)。（Z和(he)B的(de)值(zhi)應經過三級培養和(he)收(shou)(shou)集藻(zao)(zao)(zao)水(shui)后(hou)才知道近(jin)似(si)數(shu)值(zhi)）。
1—2高水(shui)位低密(mi)(mi)度接種(zhong)(zhong)（接種(zhong)(zhong)密(mi)(mi)度為P×10^4cell/ml,P為接種(zhong)(zhong)密(mi)(mi)度萬(wan)位數值）（未特(te)別說明(ming)的藻水(shui)藻細胞密(mi)(mi)度就(jiu)是(shi)cell/ml）（以下的推理是(shi)建立在三級藻第二次加(jia)水(shui)和收獲密(mi)(mi)度為10^6級）。
若一(yi)天(tian)三(san)級(ji)濃縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求(qiu)量為(wei)A升，則(ze)(ze)總(zong)(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)目為(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)A升濃縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所(suo)含的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)濃縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)千萬位(wei)(wei)的(de)(de)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)),一(yi)般情況下(xia)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)的(de)(de)密(mi)度(du)為(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度(du)百萬位(wei)(wei)的(de)(de)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)),若一(yi)天(tian)接(jie)種(zhong)E噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)，則(ze)(ze)一(yi)天(tian)需要(yao)二級(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)體積d=E×10^6×P×10^4/C×10^6=EP×10/C升，第三(san)天(tian)加(jia)(jia)水(shui)F噸(dun)，此時加(jia)(jia)水(shui)后(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6 cell/ml（Y為(wei)第三(san)天(tian)加(jia)(jia)F噸(dun)水(shui)之前(qian)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)百萬位(wei)(wei)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)），然后(hou)(hou)第五(wu)天(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)目應(ying)(ying)為(wei)H=（E+F）×10^6×Z×10^6 (Z為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)度(du)百萬位(wei)(wei)數(shu)(shu)(shu),H為(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)目)，因為(wei)總(zong)(zong)需求(qiu)量的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)(shu)目應(ying)(ying)等于最(zui)后(hou)(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)(zong)數(shu)(shu)(shu)目，則(ze)(ze)K=H,則(ze)(ze) A×10^3×B×10^7 =（E+F）×10^6×Z×10^6經(jing)過計算(suan)是A×B=(E+F) ×100×Z, (一(yi)般情況下(xia)E和(he)F的(de)(de)值(zhi)接(jie)近)，則(ze)(ze)近似AB=200EZ, 即若一(yi)天(tian)需要(yao)濃縮(suo)(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升，則(ze)(ze)每(mei)天(tian)應(ying)(ying)接(jie)種(zhong)E=AB÷200Z噸(dun)水(shui)。（Z和(he)B的(de)(de)值(zhi)應(ying)(ying)經(jing)過三(san)級(ji)培養和(he)收集(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)后(hou)(hou)才知道近似數(shu)(shu)(shu)值(zhi)）。
2—1低水(shui)(shui)位(wei)高密(mi)度接(jie)種(zhong)(zhong)（接(jie)種(zhong)(zhong)密(mi)度為(wei)P×10^5cell/ml,P為(wei)接(jie)種(zhong)(zhong)密(mi)度十(shi)萬位(wei)數值）（未特別(bie)說明藻(zao)水(shui)(shui)藻(zao)細胞密(mi)度就是cell/ml）（以下的(de)(de)推理是建立(li)在三級(ji)藻(zao)第二次(ci)，第三次(ci)加水(shui)(shui)和收獲的(de)(de)密(mi)度為(wei)105級(ji)）。
若一天(tian)三級濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需(xu)求(qiu)量(liang)為(wei)(wei)(wei)A升(sheng)，則總(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)目為(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)A升(sheng)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)值，B為(wei)(wei)(wei)濃(nong)縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度千萬位(wei)的數(shu)(shu)(shu)值),一般情(qing)況下(xia)二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種的密(mi)度為(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)度百萬位(wei)的數(shu)(shu)(shu)值),若第(di)一天(tian)接種E噸(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)，則一天(tian)需(xu)要二級藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升(sheng)，第(di)二天(tian)加水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)F噸(dun)，此時加水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度E×10^6×Y×10^5/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)第(di)二天(tian)加F噸(dun)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)之前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度十萬位(wei)數(shu)(shu)(shu)值），然后(hou)第(di)三天(tian)加水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)G噸(dun)時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)密(mi)度應為(wei)(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^5/(E+F+G)×10^6(Z為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度十萬位(wei)數(shu)(shu)(shu))，第(di)四(si)天(tian)或第(di)五天(tian)收獲時，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)目應為(wei)(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^5(W為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)密(mi)度十萬位(wei)數(shu)(shu)(shu),H為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)目)，因(yin)為(wei)(wei)(wei)總(zong)需(xu)求(qiu)量(liang)的藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)(shu)(shu)目應等于最后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池(chi)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)總(zong)數(shu)(shu)(shu)目。
則(ze)K=H,則(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^5經過計算是(shi)A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一般情(qing)況下E,F,G的值(zhi)(zhi)接近)，則近似AB=30EW, 即若一天需要濃縮藻(zao)(zao)A升，則每天應接種E=AB÷30W噸水(shui)。（W和B的值(zhi)(zhi)應經過三級培養和收集藻(zao)(zao)水(shui)后才(cai)知(zhi)道(dao)近似數值(zhi)(zhi)）。
2—2低水(shui)位高密度(du)接種(zhong)(zhong)（接種(zhong)(zhong)密度(du)為P×10^5cell/ml,P為接種(zhong)(zhong)密度(du)十萬位數值）（未特(te)別說明藻(zao)水(shui)藻(zao)細胞(bao)密度(du)就是(shi)cell/ml）（以(yi)下的(de)推理是(shi)建(jian)立在(zai)三級(ji)藻(zao)第二次，第三次加水(shui)和(he)收獲的(de)密度(du)為10^6級(ji)）。
若(ruo)一天三級(ji)(ji)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)需求(qiu)量(liang)為(wei)(wei)(wei)A升(sheng)(sheng)(sheng)，則(ze)(ze)總(zong)(zong)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)目為(wei)(wei)(wei)K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為(wei)(wei)(wei)A升(sheng)(sheng)(sheng)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)所含的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)值(zhi)，B為(wei)(wei)(wei)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)千萬(wan)(wan)(wan)(wan)位(wei)(wei)的(de)(de)數(shu)(shu)值(zhi)),一般(ban)情(qing)(qing)況下(xia)二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)的(de)(de)密(mi)(mi)度(du)為(wei)(wei)(wei)C×10^6cell/ml(C為(wei)(wei)(wei)二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)密(mi)(mi)度(du)百(bai)萬(wan)(wan)(wan)(wan)位(wei)(wei)的(de)(de)數(shu)(shu)值(zhi)),若(ruo)一天接(jie)種(zhong)E噸(dun)(dun)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)，則(ze)(ze)一天需要(yao)二(er)級(ji)(ji)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)種(zhong)體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升(sheng)(sheng)(sheng)，第二(er)天加(jia)(jia)(jia)水(shui)F噸(dun)(dun)，此時(shi)加(jia)(jia)(jia)水(shui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度(du)E×10^6×Y×10^6/(E+F)×10^6cell/ml（Y為(wei)(wei)(wei)第二(er)天加(jia)(jia)(jia)F噸(dun)(dun)水(shui)之(zhi)前藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度(du)百(bai)萬(wan)(wan)(wan)(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu)值(zhi)），然后(hou)第三天加(jia)(jia)(jia)水(shui)G噸(dun)(dun)時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)密(mi)(mi)度(du)應(ying)為(wei)(wei)(wei)J=（E+F）×10^6×Z×10^6/(E+F+G) ×10^6 (Z為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度(du)百(bai)萬(wan)(wan)(wan)(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu))，第四天或第五天收獲時(shi)，藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)(zong)數(shu)(shu)目應(ying)為(wei)(wei)(wei)H=（E+F+G）×10^6×W×10^6 (W為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)密(mi)(mi)度(du)百(bai)萬(wan)(wan)(wan)(wan)位(wei)(wei)數(shu)(shu),H為(wei)(wei)(wei)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)(zong)數(shu)(shu)目)，因為(wei)(wei)(wei)總(zong)(zong)需求(qiu)量(liang)的(de)(de)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)(shu)目應(ying)等(deng)于最(zui)后(hou)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)池藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)細(xi)胞(bao)(bao)總(zong)(zong)數(shu)(shu)目，則(ze)(ze)K=H,則(ze)(ze)A×10^3×B×10^7=（E+F+G）×10^6×W×10^6經過計算(suan)是(shi)A×B=(E+F+G) ×10×W。(一般(ban)情(qing)(qing)況下(xia)E,F,G的(de)(de)值(zhi)接(jie)近)，則(ze)(ze)近似AB=300EW, 即若(ruo)一天需要(yao)濃縮(suo)藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)A升(sheng)(sheng)(sheng)，則(ze)(ze)每天應(ying)接(jie)種(zhong)E=AB÷300W噸(dun)(dun)水(shui)。（W和B的(de)(de)值(zhi)應(ying)經過實地三級(ji)(ji)培(pei)養和收集藻(zao)(zao)(zao)(zao)(zao)水(shui)后(hou)才知道近似數(shu)(shu)值(zhi)）。
